%0 Journal Article
%T 利用枯草芽孢杆菌ytkA和ywoF基因启动子与信号肽重组分泌表达mpd基因
%A 张晓舟
%A 闫新
%A 崔中利
%A 李顺鹏
%J 生物工程学报
%D 2006
%I 
%X 用大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭载体pNW33N和去除了信号肽编码序列的成熟mpd基因构建了穿梭启动子探针pNW33N-mpd。用该探针从质粒pMPDP3和pMPDP29上克隆来自于枯草芽孢杆菌ytkA和ywoF基因上游的启动子功能片段，构建了穿梭表达载体pNYTM和pNYWM。将表达载体pNYTM和pNYWM转入枯草芽孢杆菌1A751获得表达菌株1A751(pNYTM)和1A751(pNYTM)，mpd基因在ytkA和ywoF基因的启动子和信号肽的带动下实现了分泌表达且具有天然活性，结果表明ytkA基因的启动子强度强于ywoF基因的启动子。利用ytkA基因的强启动子和nprB基因的分泌型信号肽编码序列构建了新的穿梭分泌表达载体pYNMK，并使mpd基因在枯草芽孢杆菌WB800中得到了更高水平的分泌表达，表达菌株WB800(pYNMK)在培养到第84 h时甲基对硫磷水解酶酶活达到最高值为10.40 u/mL，是出发菌株邻单胞菌M6表达量的10.8倍，重组表达产物有91.4%分泌在培养基中。
%K 枯草芽孢杆菌，
%K ytkA基因，
%K ywoF基因，
%K 启动子，
%K 信号肽，
%K mpd基因，
%K 分泌表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=019E735C0B75EB9D62B30EADE20137B2&yid=37904DC365DD7266&vid=BC12EA701C895178&iid=0B39A22176CE99FB&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0