%0 Journal Article
%T 来源于Escherichia coli的高比活植酸酶基因的高效表达
%A 罗会颖
%A 姚斌
%A 袁铁铮
%A 王亚茹
%A 史秀云
%A 伍宁丰
%A 范云六
%J 生物工程学报
%D 2004
%I 
%X 高效表达高比活植酸酶是进一步提高植酸酶发酵效价、降低植酸酶生产成本的一个有效途径。对源于Escherichia coli的高比活植酸酶基因appA，按照毕赤酵母（Pichia pastoris）密码子的偏爱进行了密码子优化改造。该改造后的基因appA-m按正确的阅读框架融合到毕赤酵母表达载体pPIC9上的α-因子信号肽编码序列3′端，通过电击转化得到重组转化子。对重组毕赤酵母的Southern blotting分析证实植酸酶基因已整合到酵母基因组中，并确定了整合基因的拷贝数。Northern blotting分析证实植酸酶基因得到了正常转录。SDS-PAGE分析和表达产物的研究表明，植酸酶得到了高效分泌表达，在5L发酵罐中植酸酶蛋白表达量达到2.5mg/mL发酵液, 酶活性(发酵效价)达到7.5×106IU/mL发酵液以上, 大大高于目前报道的各种植酸酶基因工程菌株的发酵效价。
%K 高比活植酸酶，
%K 基因改造，
%K 毕赤酵母，
%K 高效表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=90A0832E679B8C14882DBD829D2D701E&yid=D0E58B75BFD8E51C&vid=A04140E723CB732E&iid=CA4FD0336C81A37A&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0