%0 Journal Article
%T Construction of Pichia pastoris strain expressing salivary plasminogen activator from vampire bat (Desmodus rotundus)<br>表达食血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂的毕赤酵母菌株的构建
%A Yan Liu
%A Chang Su
%A Xiaoshuang Song
%A Yalan Tang
%A Zhenhong Bao
%A <br>刘堰
%A 苏畅
%A 宋小双
%A 汤雅岚
%A 包振鸿
%J 生物工程学报
%D 2009
%I 
%X 食血蝙蝠(Desmodus rotundus)在吸食大型动物血液时能保持创口处血流的畅通。本研究根据食血蝙蝠唾液中发现的纤溶酶原激活剂(Bat-PA,另称DSPAα1)的全长基因序列(GenBank Accession No.J05082),首次在体外人工合成Bat-PA全长基因并亚克隆到巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPIC9K上;转化毕赤酵母菌株GS115后,经甲醇诱导获得DSPAα1的分泌型表达,表达条带为47kD;通过抗G418浓度梯度筛选、毕赤酵母中小量表达后SDS-PAGE电泳检测以及纤维平板法测活,筛选出高表达的DSPAα1稳定菌株,对电泳中的目的蛋白条带进行密度扫描测定,产量达到约30mg/L。目前,DSPAα1主要来自哺乳动物细胞,如中国仓鼠卵巢细胞(CHO)、胚胎卵巢肾细胞(BHK)、非洲绿猴肾细胞(COS),代价高昂。在毕赤酵母中生产DSPAα1可以降低成本,增加产率,为探索Bat-PA作为新一代溶栓剂奠定基础。
%K vampire bat
%K plasminogen activator
%K Pichia pastoris
%K high expression
%K fibrin plate assay<br>食血蝙蝠
%K 纤溶酶原激活剂
%K 毕赤酵母
%K 高效表达
%K 纤维平板法
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=EE234DD075A5EDE69C197D96EDC9E921&yid=DE12191FBD62783C&vid=C5154311167311FE&iid=E158A972A605785F&sid=CDC418F38C4BFD60&eid=F6467E7C54ED952D&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=19