%0 Journal Article %T Detection of microcystins based on yeast two-hybrid system
基于酵母双杂交的微囊藻毒素检测系统初探 %A PAN Xiao %A SHEN Ping-Ping %A HUA Zi-Chun %A
潘晓 %A 沈萍萍 %A 华子春 %J 水生生物学报 %D 2008 %I %X 微囊藻毒素是由淡水微囊藻产生的次生代谢物,结构为环状七肽,分子量约1000Da,对生物机体具有多种毒理作用,是一类较强的肿瘤促进剂,目前没有比较简单便宜的藻毒素检测方法,本文探索建立利用酵母双杂交系统进行藻毒素检测的方法.前期实验已用噬菌体表面展示肽库技术从随机12和7肽库中筛选获得若干与藻毒素有相互作用的多肽.本文分别挑选其中亲和力较高的3个多肽,构建到酵母双杂交系统中,将不同的肽段分别融合在含有Active Domain和Binding Domain的表达载体中,共转化酵母菌株AH109,然后测定β-半乳糖苷酶活性来反映下游报告基因半乳糖苷酶的表达情况,从而通过反映培养基里面是否含有藻毒素,进而利用此方法来比较方便地检测藻毒素. %K 微囊藻毒素 %K 酵母双杂交 %K ONPG(邻硝基苯-β-D-半乳吡喃糖苷) %K β-Gal(β-半乳糖苷酶) %K 酵母双杂交 %K 微囊藻毒素 %K 检测系统 %K SYSTEM %K YEAST %K BASED %K MICROCYSTINS %K 培养基 %K 情况 %K 表达载体 %K 半乳糖苷酶 %K 报告基因 %K 酶活性 %K 测定 %K 酵母菌株 %K 共转化 %K Binding %K Active %K Domain %K 融合 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=256651267D5D2E4520A7707D05E98747&aid=EDCFB39DF6F08CD93050AC4B87D7C2C9&yid=67289AFF6305E306&vid=59906B3B2830C2C5&iid=0B39A22176CE99FB&sid=CA4FD0336C81A37A&eid=9F6DA927E843CD50&journal_id=1000-3207&journal_name=水生生物学报&referenced_num=0&reference_num=15