%0 Journal Article
%T Overexpression of Corynebacterium glutamicum NAD kinase improves L-isoleucine biosynthesis<br>谷氨酸棒杆菌NAD激酶的过表达对L-异亮氨酸合成的促进作用
%A Xiaojing Huan
%A Kun Li
%A Feng Shi
%A Xiaoyuan Wang
%A <br>还晓静
%A 李坤
%A 史锋
%A 王小元
%J 生物工程学报
%D 2012
%I 
%X NAD激酶催化辅酶ⅠNAD(H)]发生磷酸化，转变成辅酶ⅡNADP(H)]，而还原态辅酶Ⅱ (NADPH) 是L-异亮氨酸合成的必要辅因子。为了提高NADPH的供应，首先克隆了谷氨酸棒杆菌NAD激酶基因ppnK，并利用大肠杆菌-棒状杆菌诱导型穿梭表达载体pDXW-8和组成型穿梭表达载体pDXW-9在L-异亮氨酸合成菌——乳糖发酵短杆菌JHI3-156中进行表达。摇瓶发酵后，ppnK诱导表达菌JHI3-156/pDXW-8-ppnK的NAD激酶酶活 (4.33±0.74 U/g) 比pDXW-8空载菌提高了83.5％，辅酶Ⅱ与辅酶Ⅰ的比例提高了63.8％，L-异亮氨酸产量 (3.86±0.12 g/L) 提高了82.9％；ppnK组成表达菌JHI3-156/pDXW-9-ppnK的NAD激酶酶活 (7.67±0. 65 U/g) 比pDXW-9空载菌提高了2.20倍，辅酶Ⅱ与辅酶Ⅰ的比例提高了1.34倍，NADPH含量提高了21.7％，L-异亮氨酸产量 (2.99±0.18 g/L) 提高了41.7％。这说明NAD激酶有助于辅酶Ⅱ的供应和L-异亮氨酸的生物合成，这对于其他氨基酸的生产也有一定的参考依据。
%K L-isoleucine
%K NAD kinase
%K inducible expression
%K constitutive expression
%K Brevibacterium lactofermentum<br>L-异亮氨酸，NAD激酶，诱导型表达，组成型表达，乳糖发酵短杆菌
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=22653CDAF59BBDC1BFBF78E1C92A1CCF&yid=99E9153A83D4CB11&vid=D3E34374A0D77D7F&iid=9CF7A0430CBB2DFD&sid=11924CB7A7AEB526&eid=1EA033F7E0CC5F25&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0