%0 Journal Article %T Overexpression of Corynebacterium glutamicum NAD kinase improves L-isoleucine biosynthesis
谷氨酸棒杆菌NAD激酶的过表达对L-异亮氨酸合成的促进作用 %A Xiaojing Huan %A Kun Li %A Feng Shi %A Xiaoyuan Wang %A
还晓静 %A 李坤 %A 史锋 %A 王小元 %J 生物工程学报 %D 2012 %I %X NAD激酶催化辅酶ⅠNAD(H)]发生磷酸化,转变成辅酶ⅡNADP(H)],而还原态辅酶Ⅱ (NADPH) 是L-异亮氨酸合成的必要辅因子。为了提高NADPH的供应,首先克隆了谷氨酸棒杆菌NAD激酶基因ppnK,并利用大肠杆菌-棒状杆菌诱导型穿梭表达载体pDXW-8和组成型穿梭表达载体pDXW-9在L-异亮氨酸合成菌——乳糖发酵短杆菌JHI3-156中进行表达。摇瓶发酵后,ppnK诱导表达菌JHI3-156/pDXW-8-ppnK的NAD激酶酶活 (4.33±0.74 U/g) 比pDXW-8空载菌提高了83.5%,辅酶Ⅱ与辅酶Ⅰ的比例提高了63.8%,L-异亮氨酸产量 (3.86±0.12 g/L) 提高了82.9%;ppnK组成表达菌JHI3-156/pDXW-9-ppnK的NAD激酶酶活 (7.67±0. 65 U/g) 比pDXW-9空载菌提高了2.20倍,辅酶Ⅱ与辅酶Ⅰ的比例提高了1.34倍,NADPH含量提高了21.7%,L-异亮氨酸产量 (2.99±0.18 g/L) 提高了41.7%。这说明NAD激酶有助于辅酶Ⅱ的供应和L-异亮氨酸的生物合成,这对于其他氨基酸的生产也有一定的参考依据。 %K L-isoleucine %K NAD kinase %K inducible expression %K constitutive expression %K Brevibacterium lactofermentum
L-异亮氨酸,NAD激酶,诱导型表达,组成型表达,乳糖发酵短杆菌 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=22653CDAF59BBDC1BFBF78E1C92A1CCF&yid=99E9153A83D4CB11&vid=D3E34374A0D77D7F&iid=9CF7A0430CBB2DFD&sid=11924CB7A7AEB526&eid=1EA033F7E0CC5F25&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0