%0 Journal Article
%T Construction, expression and enzymatic activity analysis of AUR1 eukaryotic expression vector of Botrytis cinerea<br>灰葡萄孢菌AUR1基因真核表达载体的构建、表达及酶活性分析
%A Yongchun Qiu
%A Xiaoping Liu
%A Ping Gou
%A <br>邱永春
%A 刘小平
%A 苟萍
%J 生物工程学报
%D 2013
%I 
%X 为了研究灰葡萄孢菌肌糖磷脂酰神经酰胺合成酶 (BcAUR1基因) 的表达及酶活性，采用RT-PCR方法，利用含有FLAG标签以及BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的AUR1特异引物从灰葡萄孢菌中扩增得到BcAUR1基因。将BcAUR1基因与穿梭质粒pYES2重组，得到pYES2-BcAUR1质粒采用醋酸锂转化法导入酿酒酵母尿嘧啶突变菌株Δyor1中，Western blotting检测肌糖磷脂酰神经酰胺 (IPC) 合成酶表达，HPLC检测IPC合成酶活力。结果显示pYES2-BcAUR1在酿酒酵母尿嘧啶突变菌株Δyor1中获得表达，pYES2-BcAUR1转化子IPC合成酶活性显著增高，比空载转化子约提高1倍。低浓度的AbA能够抑制空载pYES2酵母转化子生长，但pYES2-BcAUR1酵母转化子能抵抗AbA对菌体生长的抑制。
%K pYES2 shuttle plasmid
%K Botrytis cinerea
%K inositol phosphorylceramide (IPC) synthase
%K Aureobasidin A
%K enzyme activity<br>pYES2穿梭载体，灰葡萄孢菌，肌糖磷脂酰神经酰胺合成酶，短梗霉素A，酶活力
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=2DB3B6D3544EDEBD8B14A352588ADD94&yid=FF7AA908D58E97FA&vid=771469D9D58C34FF&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=46CB27789995047D&eid=7AA74D31F1FF2DCE&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0