%0 Journal Article
%T Fusion Expression and Biological Activity Analysis of ESAT-6 Protein in Pichia pastoris<br>结核分枝杆菌ESAT-6蛋白在毕赤酵母中的融合表达及其活性研究
%A LIU Lin
%A ZHAO Zhi-An
%A WANG Hong-Hai
%A SONG Da-Xin
%A <br>刘林
%A 赵志安
%A 王洪海
%A 宋大新
%J 生物工程学报
%D 2004
%I 
%X 为了获得结核分枝杆菌ESAT 6蛋白在毕赤氏酵母中的高效表达 ,将人α-2a干扰素基因、结核分枝杆菌esat-6基因经PCR扩增并加上相应的酶切位点 ,两基因之间的DNA接头编码肠激酶识别的多肽 ,DNA经酶切连接插入分泌型载体pPIC9K ,将重组表达质粒pPIC9K-α2a-esat6用SalⅠ单酶切之后 ,电击转入PichiapastorisSMD1168中 ,采用G418梯度筛选获得高抗性转化子。以甲醇作为诱导物 ,发酵4d后取上清 ,进行SDS PAGE和Westernblot鉴定并分析表达产物的干扰素活性。结果表明 ,重组菌株成功地分泌表达了分子量大小约为 30kD的融合蛋白 ,表达产物不仅具有较高的干扰素活性 ,而且可以和结核病人血清发生特异性结合 ,为结核病的特异性诊断和结核病新型疫苗的研制打下了基础.
%K ESAT-6蛋白
%K 人α-2a干扰素
%K 分泌型载体
%K 酵母SMD1168
%K 融合表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=BFC2AD4544BF2ADF&yid=D0E58B75BFD8E51C&vid=A04140E723CB732E&iid=B31275AF3241DB2D&sid=808D6B9EB5A8B4B4&eid=CFC2B32D03D9F610&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=13