%0 Journal Article %T 用克隆池PCR法筛选小麦簇毛麦易位系6VS/6AL基因组TAC文库获得抗病基因候选克隆 %A 秦跟基 %A 陈佩度 %A 刘耀光 %A 方玉达 %A 刘大钧 %J 生物工程学报 %D 2002 %I %X 用根据抗病基因保守区设计的一对简并性引物,从小麦簇毛麦易位系6VS/6AL cDNA中PCR扩增获得一个具有抗病基因核苷酸结合位点(Nucleotide binding site, NBS)结构特点的DNA片段克隆N7。从小麦簇毛麦易位系6VS/6AL基因组TAC(Transformationcompetent artificial chromosome, TAC)文库的22块96孔板提取所有2112个克隆池(每个池含约1000个克隆)的质粒,再根据N7的核苷酸序列设计一对特异引物,用克隆池PCR(pooled PCR)法经分级筛选从文库中获得一个阳性克隆。以N7为探针,通过Southern 杂交证实了该TAC克隆为真正含有抗病候选基因的克隆。研究结果表明克隆池PCR法对克隆数目巨大的基因组文库的筛选很有效。 %K 小麦簇毛麦易位系, %K 小麦基因组TAC文库, %K 克隆池PCR筛选, %K 抗病候选基因 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=0B4C4211C1A1D5A1022DD5FDD37D1B3D&yid=C3ACC247184A22C1&vid=13553B2D12F347E8&iid=38B194292C032A66&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0