%0 Journal Article %T Improved Expression of HLA-A*2402-BSP in Escherichia coli and Its Tetramer Preparation
HLA-A*2402-BSP在大肠杆菌中的优化表达及其四聚体的制备和鉴定 %A JIA Qian-Tao %A XU Li-Hui %A LI Feng-Yao %A ZHA Qing-Bing %A HE Xian-Hui %A
贾仟涛 %A 徐丽慧 %A 李丰耀 %A 查庆兵 %A 何贤辉 %J 生物工程学报 %D 2007 %I %X HLA-A*2402是中国人群中最常见的等位基因之一,为研究该基因型人群的人巨细胞病毒(HCMV)特异性细胞毒T细胞(CTL)免疫应答,需要制备负载相应抗原肽的HLA-A*2402四聚体。以RT-PCR方法克隆HLA-A*2402重链基因的cDNA,并构建了羧基端融合生物素化酶BirA底物肽(BSP)的HLA-A*2402重链胞外域融合蛋白(HLA-A*2402-BSP)的表达载体,但该载体不能在大肠杆菌(E. coli)中有效表达HLA-A*2402-BSP融合蛋白;通过对氨基端(N端)区域编码区的密码子进行优化,构建了同义突变的HLA-A*2402-BSP表达载体,融合蛋白在E. coli中获得了高效表达。进而制备了负载HLA-A*2402限制性HCMV pp65341-349抗原肽(QYDPVAALF, QYD)的可溶性HLA-A*2402-QYD单体分子和四聚体,获得的四聚体具有与HLA-A24+供者抗原特异性CTL的结合活性,特异性CTL的频率为总CD8+T细胞的0.09%~0.37%。这些结果为进一步研究HLA-A*2402限制性的特异性CTL免疫应答规律奠定基础。 %K 四聚体, %K HLA-A*2402, %K 巨细胞病毒, %K 密码子优化, %K 原核表达, %K 包涵体 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=E5D342E4AD14A536F366201F107B3C08&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=EA389574707BDED3&iid=0B39A22176CE99FB&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0