%0 Journal Article
%T 融合牛肠激酶轻链EKL包涵体蛋白的复性纯
%A 易进华
%A 张元兴
%J 生物工程学报
%D 2006
%I 
%X 大肠杆菌高密度发酵表达肠激酶轻链融合蛋白DsbA-rEKL，主要以包涵体形式存在。包涵体经4mol/L尿素和 0.5% Triton X100洗涤，以6mol/L盐酸胍、100mmol/L DTT溶解，在胱氨酸存在下，以脉冲加样方式复性。融合蛋白复性在6mmol/L胱氨酸存在下、脉冲加量0.03mg/mL和复性终蛋白浓度0.3mg/mL为最佳复性方案。 复性的融合蛋白加2mmol/L CaCL2后快速自切。经IDASepharose及Qsepharose 纯化，rEKL纯度可达95%以上，可高效酶切重组瑞特普酶融合蛋白Trx-rPA。实现了大规模生产rEKL，每升发酵液经复性及纯化后，可得rEKL 60mg/L以上，使以融合蛋白表达rPA等药用蛋白成为现实。
%K 融合蛋白，
%K 肠激酶，
%K 复性，
%K 包涵体
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=7BD8CDE1C581BBFA7EBC87208EE77985&yid=37904DC365DD7266&vid=BC12EA701C895178&iid=94C357A881DFC066&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0