%0 Journal Article
%T 蚯蚓纤溶酶基因（Efp-Ⅰ）在大肠杆菌中的克隆、表达及活性分析
%A 赵晓瑜
%A 李晓霞
%A 侯艳
%A 静天玉
%J 生物工程学报
%D 2007
%I 
%X 从GenBank查询到的蚯蚓纤溶酶（earthworm fibrinolytic enzyme，EFE）基因序列中，只有AY438624翻译的蛋白质序列与天然EfP-Ⅰ在N-端具有较高的相似性。根据该基因的5′与3′序列设计引物，通过RT-PCR从赤子爱胜蚓(Eisenia fetida)获得一个完整的基因（GenBank，DQ418454）。序列分析证明，由该基因编码蛋白质的N-末端与天然EfP-Ⅰ的N-末端的氨基酸顺序完全相同。ScanProsite prediction programs分析显示，该基因与AY438624相似性极高，二者均属于胰蛋白酶家族；不同的是，该基因编码蛋白质的序列中含有N-糖苷键的结构域，所以DQ418454是EfP-Ⅰ中的一个新基因。在此基础上，构建了该基因的原核表达载体pMAL-c2X-Efp-Ⅰ，并进行了转化、诱导和表达。Western blotting证明，表达产物同时具有MBP和EfP-Ⅰ的抗原特异性，是MBP和EfP-Ⅰ的融合蛋白（MBP-EfP-Ⅰ）。经亲和层析分离纯化的MBP-EfP-Ⅰ，在酪蛋白平板和纤维蛋白平板上表现出明显的纤溶酶活性。
%K 赤子爱胜蚓，
%K 蚯蚓纤溶酶，
%K 基因克隆，
%K 融合表达，
%K 纤溶酶活性
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=66DBDF64052DE58B8CE5C27000A0871C&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=EA389574707BDED3&iid=38B194292C032A66&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0