%0 Journal Article %T S1核酸酶作用与微环DNA分子的克隆策略 %A 白艳玲 %A 杨之龙 %A 乔明强 %A 张秀明 %A 周静 %A 高才昌 %J 生物工程学报 %D 2004 %I %X 米曲霉来源的S1核酸酶具有降解单链DNA或RNA的作用。在适当的条件下, 该酶能将不同的环形DNA分子从超螺旋转变成开环和线形结构,对质粒Puc19的实验证明, S1核酸酶的这种转变作用与加入的酶量呈正相关。在25μL总反应体积中,按100ng DNA加入5u至17u的S1核酸酶,能获得较高比例的线形DNA。由于微环DNA分子太小,单酶切位点的出现率较低,很难用常规方式进行克隆,以S1核酸酶进行线形化是微环DNA克隆的途径。pC3是已知最小的真核生物线粒体DNA类质粒(537bp),经S1核酸酶线形化后,成功地克隆到pMD18-T载体上。 %K S1核酸酶,微环DNA,线形化,分子克隆 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=8D909500BB282244E2200A280660A81B&yid=D0E58B75BFD8E51C&vid=A04140E723CB732E&iid=0B39A22176CE99FB&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0