%0 Journal Article %T 蚯蚓纤溶酶新基因EfP-0的电子克隆及其编码区序列RT-PCR验证 %A 赵晓瑜 %A 高珊 %A 崔大岺 %A 耿风廷 %J 生物工程学报 %D 2006 %I %X 利用生物信息学手段,以期获得蚯蚓纤溶酶F-Ⅰ-0组分的基因。根据从粉正蚓(Lumbricus rubellus)中分离的FⅠ0组分的N端氨基酸序列VVGGSDTTIGQYPHQL,利用DNAMAN软件通过电子克隆方法,从Lumbricidae 的dbEST中获得该组分的核酸序列信息,设计特异引物, 经过RT-PCR,成功地从赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)中克隆到一条蚯蚓纤溶酶新基因,命名为EfP-0。EfP-0基因全长678bp, 编码225个氨基酸的成熟肽,属丝氨酸蛋白酶,胰蛋白酶家族,与F-Ⅰ-0组分的氨基酸组成非常接近。BLAST证明,EfP-0与已报道的蚯蚓纤溶酶基因之间的相似性均低于40%,因此为蚯蚓纤溶酶中的一个新基因,GenBank 登录号为DQ836917。构建的pMAL-c2x-EfP-0重组质粒,在大肠杆菌TB1中获得融合蛋白MBP-EfP-0的可溶性表达,表达产物有酪蛋白平板溶解活性。 %K 蚯蚓纤溶酶, %K 电子克隆, %K EfP-0 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=3899AE2C4920AF933FAFC05C81420D7E&yid=37904DC365DD7266&vid=BC12EA701C895178&iid=B31275AF3241DB2D&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0