%0 Journal Article
%T Construction of Rat Bdnf Gene Lentiviral Vector and Its Expression in Mesenchymal Stem Cells<br>大鼠Bdnf基因慢病毒载体的构建及其在骨髓间质干细胞中的表达
%A HUANG Dong-Yu
%A ZHANG Zhi-Jian
%A CHEN Bai-Ling
%A WU Xiu-Li
%A WANG Ning
%A ZHANG Yan-Ding
%A <br>黄东煜
%A 张志坚
%A 陈柏龄
%A 吴秀丽
%A 王柠
%A 张彦定
%J 生物工程学报
%D 2007
%I 
%X 骨髓间质干细胞（MSCs）是目前基因工程正在探讨应用的靶细胞，为构建带有脑源性神经营养因子（Bdnf）基因慢病毒载体并使其在大鼠骨髓间质干细胞中表达，采用RT-PCR技术获得大鼠Bdnf基因编码区（CDS）片段，限制性内切酶酶切和基因重组构建慢病毒载体质粒PNL-BDNF-IRES2-EGFP，在脂质体介导下与包装质粒HELPER，包膜质粒VSVG共转染293T细胞包装生产慢病毒。所获慢病毒感染大鼠MSCs（rMSCs）后，PCR和免疫细胞化学法检测在rMSCs中Bdnf基因的插入和表达。结果显示所获的Bdnf基因经测序后与GenBank报道序列完全一致。重组慢病毒载体质粒PNL-BDNF-IRES2-EGFP经鉴定正确。三质粒共转染293T细胞成功，收集、浓缩病毒后测定其滴度为6.7×107TU/mL， PCR证实Bdnf基因插入病毒基因组。感染rMSCs后RT-PCR、免疫细胞化学染色及Western检测各组细胞均有BDNF蛋白表达，其中试验组BDNF-rMSCs更大量表达BDNF，与其余2组(Mock-rMSCs、rMSCs)比较差异具有统计学意义。构建带有Bdnf基因慢病毒载体并在大鼠骨髓间质干细胞中成功表达，为今后基因修饰干细胞的移植后长期观察研究奠定了基础。
%K lentiviral vector
%K BDNF
%K mesenchymal stem cells
%K rat<br>慢病毒，BDNF，骨髓间质干细胞，大鼠
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=03560FAA04AD336B322BEB4514E15838&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=EA389574707BDED3&iid=0B39A22176CE99FB&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0