%0 Journal Article
%T pBR322-Red在大肠杆菌lac操纵子基因敲除和敲入中的应用
%A 陈伟
%A 于梅
%A 李山虎
%A 王鸣刚
%A 周建光
%J 生物工程学报
%D 2005
%I 
%X pBR32 2 - Red是一种新型重组工程系统 ,它携带了λ-噬菌体Red重组酶基因和一系列调控元件。对pBR32 2 Red最优重组条件进行探索后应用该质粒提供的体内同源重组功能 ,在菌株W3110体内 ,对染色体上的lac操纵子进行了基因修饰 ,包括 :①运用kan-sacB选择反选择方法和重叠引物方法敲除了阻遏基因lacI,②运用kan -sacB选择反选择方法和线性双链DNA介导的DNA重组方法将报告基因lacZ敲入lacA和lacY的位置 ,并且首次测定了报告基因lacZ在这三个结构基因位置的组成性表达情况。结果表明运用不同的重组策略 ,pBR32 2- Red系统都能方便有效地对大肠杆菌W3110染色体进行基因敲除和敲入修饰。
%K pBR322-Red
%K 同源重组
%K lac操纵子
%K 敲除
%K 敲入
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=9DBD7781EF22F86BCE212B243788F9A5&yid=2DD7160C83D0ACED&vid=659D3B06EBF534A7&iid=0B39A22176CE99FB&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0