%0 Journal Article
%T Real-time quantitative RT-PCR assay for detection of IHNV in fish<br>实时定量RT-PCR检测鱼类传染性造血器官坏死病毒方法的建立与应用
%A YUE Zhi-Qin
%A LIU Hong
%A LIANG Cheng-Zhu
%A GAO Hong-Wei
%A XU Biao
%A DENG Ming-Jun
%A JIANG Yu-Lin
%A <br>岳志芹
%A 刘荭
%A 梁成珠
%A 高宏伟
%A 徐彪
%A 邓明俊
%A 江育林
%J 水生生物学报
%D 2008
%I 
%X 建立了Taqman 实时定量RT-PCR方法检测传染性造血器官坏死病毒(IHNV).选取IHNV病毒的N蛋白基因保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针.以梯度稀释的含有IHNV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量RT-PCR反应以确定检测灵敏度.病毒浓度在5×106 -5个拷贝,共7个数量级的范围内,定量RT-PCR反应有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为5个拷贝.根据病毒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线.该方法具有特异性,对鲤春血症病毒(SVCV)、病毒性出血性败血症(VHSV)、传染性胰脏坏死病毒(IPNV)、草鱼呼肠孤病毒(GCRV)、流行性造血器官坏死病毒(EHNV)、EPC细胞系、牙鲆的核酸都没有扩增反应.在50批待检样品中,有3批鱼类感染IHNV,利用标准曲线进行了定量分析.实时定量RT-PCR检测IHNV方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,在鱼病的快速检测上具有重要意义.
%K IHNV
%K Real-time quantitative RT-PCR
%K Taqman probe<br>传染性造血器官坏死病毒(IHNV)
%K 实时定量RT-PCR
%K Taqman探针
%K 实时定量
%K 快速检测
%K 鱼类
%K 传染性
%K 造血器官
%K 坏死
%K 病毒
%K 方法
%K 建立与应用
%K FISH
%K DETECTION
%K ASSAY
%K 意义
%K 鱼病
%K 灵敏度
%K 定量分析
%K 感染
%K 样品
%K 扩增反应
%K 核酸
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=256651267D5D2E4520A7707D05E98747&aid=F894BD046837A358BDE10DDE5BC09A48&yid=67289AFF6305E306&vid=59906B3B2830C2C5&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=C753EB8AC8F551B9&eid=C36EC077A8A90308&journal_id=1000-3207&journal_name=水生生物学报&referenced_num=0&reference_num=14