%0 Journal Article
%T Research on Secretion Expression in Pichia pastoris and Function of the HC-Pro Gene of Watermelon Mosaic Virus<br>西瓜花叶病毒HC-Pro基因在毕赤酵母中的分泌表达与功能研究
%A ZHANG Jian-Xin
%A WU Yun-Feng
%A WANG Xiu-Min
%A <br>张建新
%A 吴云锋
%A 王秀敏
%J 生物工程学报
%D 2007
%I 
%X 利用RT-PCR方法扩增出西瓜花叶病毒HC-Pro的基因，长度为1371bp，并构建了真核表达质粒pPIC9K-WHC。将重组质粒经SalⅠ单酶切后电转化Pichia pastoris GS115菌株，经PCR鉴定与G418、MD和MM培养基筛选，获得Mut+/His+表型高拷贝转化子。经1%甲醇诱导5d后，SDS-PAGE检测发酵液上清，在66kD处有一特异蛋白条带表达。Western blot 鉴定表明，表达蛋白可以和HC-Pro蛋白抗血清发生结合反应。Far-Western blot 证明该蛋白能与西瓜花叶病毒CP蛋白结合，支持了HC-Pro蛋白协助传毒的“桥梁”学说。
%K 西瓜花叶病毒，
%K HC-Pro，
%K 毕赤酵母，
%K 真核表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=B165DFDCF977972E6401C9793BC532E3&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=EA389574707BDED3&iid=B31275AF3241DB2D&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0