%0 Journal Article
%T Constructing and Expression of Three Zinc-fingers Peptide with Specific DNA Recognition Property in Escherichia coli<br>序列特异的三锌指多肽的构建及其在大肠杆菌中的表达
%A S X Zhang
%A Q J Ma
%A Z H Zhao
%A <br>张书祥
%A 马清钧
%A 赵志虎
%J 生物工程学报
%D 2001
%I 
%X 在获得单一锌指突变体的基础上，以小鼠转录因子Zif268的三锌指DNA结合区为模板，利用重叠(Over-lap)PCR技术，获得了关键氨基酸位点同时突变的三锌指突变体ZF123、2ZF123。ZF123、2ZF123分别克隆进pUC-18质粒，序列测定正确后，以pGEX-2T为表达质粒，在大肠杆菌JM109中实现了功能性的表达。经SDS-PAGE分析，表达出了分子量34.0kD的融合蛋白，扫描分析其含量在20%左右。菌体经超声波破碎后，对可溶性融合蛋白进行了纯化得到了游离的目的蛋白，为进一步的DNA结合特性分析、杂交转录因子的构建等奠定了基础。
%K zinc-finger protein
%K over-lap PCR
%K protein expression and purification<br>锌指蛋白，
%K 重叠PCR，
%K 蛋白表达纯化
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=7306FF677155384B&yid=14E7EF987E4155E6&vid=BCA2697F357F2001&iid=E158A972A605785F&sid=DA74B62FE4348759&eid=0493D643315CD829&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=2&reference_num=11