%0 Journal Article
%T Burkholderia pickettii中D-乙内酰脲酶基因(dha)的克隆、测序及表达
%A 许祯
%A 姜卫红
%A 焦瑞身
%A 杨蕴刘
%J 生物工程学报
%D 2002
%I 
%X 对一株能转化D，L-对羟基苯乙内酰脲为D-对羟基苯甘氨酸的菌株MMR003进行了细菌分类学鉴定，该菌为皮氏伯克霍尔德氏菌(Burkholderia pickettii)。实验通过Southern杂交，部分文库构建和筛选，并经一系列亚克隆测序分析，获得一长度为1374bp的完整开放阅读框，编码458个氨基酸的D-乙内酰脲酶基因。用该基因序列构建的高表达质粒pXZPH2转化E.coliBL21(DE3)，经IPTG诱导后，检测到D-乙内酰脲酶活性。该基因编码的氨基酸序列经Blast同源比较分析与放射形土壤杆菌NRRL B11291所产相应酶有85%的同源性。以D，L-对羟基苯乙内酰脲为底物测得的表达酶的活力为0.66u/mL，比相同条件下所测出发菌株MMR003的酶活提高了2倍。
%K 皮氏伯克霍尔德氏菌，
%K D-乙内酰脲酶，
%K 克隆，
%K 表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=95DC2D3F56872055867BE0212585599A&yid=C3ACC247184A22C1&vid=13553B2D12F347E8&iid=0B39A22176CE99FB&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0