%0 Journal Article
%T 大肠杆菌发酵生产重组人源抗
%A 安峰
%A 陈玉川
%A 范列英
%A 韩焕兴
%J 生物工程学报
%D 2003
%I 
%X 在KLF2000发酵罐中利用补料分批培养技术培养表达含重组质粒pBAD/HBs Fab的TOP10大肠杆菌，生产人源抗HBs Fab，为批量生产作准备。在发酵过程中，控制溶氧30%以上，温度37℃，在基础培养基内生长4 h后，补加以甘油为碳源的补料，继续生长到9 h，加入阿拉伯糖，至终浓度为002%,30℃诱导表达5h,收集菌体，纯化制备目的蛋白。利用Western blot方法检测Fab抗原性，Dot blot方法检测生物学活性。14h发酵结束后，菌体密度最终达96g/L,纯化所得蛋白大约占菌体总蛋白的6%，含量为80mg/L。以重组质粒pBAD/HBs Fab,大肠杆菌TOP10表达生产的人源抗HBs Fab为可溶性具生物学活性的蛋白，与包涵体表达相比避免了变性、复性这一复杂过程，发酵罐表达比率与摇瓶相比没有降低，表达量达80mg/L左右，为大批量生产作了准备。
%K 人源抗HBs
%K Fab，分批补料发酵培养
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=1CC05B9DA26F657B7091D3B38574822F&yid=D43C4A19B2EE3C0A&vid=2A8D03AD8076A2E3&iid=CA4FD0336C81A37A&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0