%0 Journal Article
%T Cloning and Expression of Kringle 1-3 Gene of Human Plasminogen and the Purification and Bioactivity of Its Expressed Product<br>人纤溶酶原K1-3基因的克隆、表达和产物的纯化及抗癌活性分析
%A 张添元
%A 罗进贤
%A 陆幸妍
%J 生物工程学报
%D 2002
%I 
%X 纤溶酶原K13功能区是近年发现的血管生成抑制因子，具有抑制肿瘤生长和转移的活性。以人血管生成抑制素cDNA为模板用PCR技术扩增了K13功能区的基因，DNA序列分析后克隆至质粒pPIC9K上获得重组质粒pPIC9K13，转化毕节酵母GS115，用PCR和G418法筛选高拷贝转化子，进行摇瓶发酵。SDSPAGE和Western blot分析结果证实K13基因已在GS115分泌表达，并具有免疫活性。选用30L和80L罐进行高密度发酵，甲醇诱导48h细胞密度达到OD250～300，比摇瓶提高5～6倍，表达量150200mg/L。发酵上清液经Streamline SP离子交换及PhenylSephorose疏水层析纯化，在SDSPAGE上显示一条带，纯度96%，动物实验证明纯化产物具有抗血管生成和抗肿瘤的活性。 
%K 人纤溶酶原K1-3，
%K 基因克隆和表达，
%K 纯化，
%K 抗癌活性
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=61F67B0FF71A5D52E007A838BCE2250C&yid=C3ACC247184A22C1&vid=13553B2D12F347E8&iid=94C357A881DFC066&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0