%0 Journal Article
%T 葡萄糖异构酶突变体酶GIG138P和GIG138P-G247D在变铅青链霉菌中的高效表达及检测
%A 朱国萍
%A 张颖
%A 徐旸
%A 唐建国
%A 徐冲
%J 生物工程学报
%D 2002
%I 
%X 将含有G138P单点突变和G138P-G247D双点突变的GI结构基因，分别克隆入E.coli链霉菌穿梭载体pHZ1272，成功构建了穿梭表达载体pHZGI1和pHZGI2。通过原生质体的转化，将穿梭表达载体导入变铅青链霉菌TK54菌株。30℃振荡培养24h，加入2 μg/mL 硫链丝菌素诱导表达12h。SDSPAGE电泳表明，两个穿梭载体在TK54菌株内表达出425 kD特异性条带。薄层扫描显示，突变体酶GIG138P和GIG138PG247D分别约占可溶性蛋白的19%和22%。Western杂交进一步证实GIG138P和GIG138PG247D在变铅青链霉菌TK54中获得了表达。
%K 葡萄糖异构酶，
%K 突变体酶，
%K 穿梭载体，
%K 变铅青链霉菌，
%K 高效表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=383335940428B7DA6C62A06A5E4897AB&yid=C3ACC247184A22C1&vid=13553B2D12F347E8&iid=38B194292C032A66&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0