%0 Journal Article
%T 人工合成的黑曲霉NRRL3135菌株植酸酶基因在毕赤酵母系统中的高效表达
%A 贝锦龙
%A 陈庄
%A 杨林
%A 廖玲
%A 王棻章
%A 蒋宗勇
%J 生物工程学报
%D 2001
%I 
%X 本文以黑曲霉(Aspergillus niger)NRRL3135菌株植酸酶基因为对象，通过基因人工合成的方法去除了该基因的内含子与信号肽编码序列，换用在毕赤酵母(Pichia pastoris)中使用频率较高的密码子以优化其表达。该人工合成植酸酶基因(PhyA-as)以N端融合的方式正确插入到毕赤酵母表达载体pPICZαA。通过电击将重组表达载体整合入酵母染色体DNA中得到重组转化子。SDSPAGE结果与表达产物酶学性质研究表明植酸酶得到分泌表达，且与天然产物性质基本一致。筛选得若干株高产基因工程菌，其中SPANⅢ菌株达到了在摇床培养条件下，每毫升发酵液产生165000u植酸酶的水平，基本满足工业化生产的要求。
%K 基因人工合成，
%K 植酸酶基因phyA-as
%K 基因克隆，毕赤酵母表达系统
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=1F2A30D4E06B9CE993A3D1E804938699&yid=14E7EF987E4155E6&vid=BCA2697F357F2001&iid=38B194292C032A66&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=4&reference_num=0