%0 Journal Article %T Expression and Purification of Recombinant Huwentoxin- Ⅰ in Pichia pastoris
重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ在巴氏毕赤酵母中的表达及纯化 %A 聂东宋 %A 李敏 %A 徐辉明 %A 何宁佳 %A 梁宋平 %J 生物工程学报 %D 2002 %I %X 纹捕鸟蛛毒素Ⅰ是从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离纯化,具有镇痛活性的肽类神经毒素。对巴氏毕赤酵母生产的重组HWTX-Ⅰ进行多步纯化,首先将分泌到培养上清的rHWTX-Ⅰ进行90%饱和度的(NH4)2SO4沉淀,再用截留分子量3kD的滤膜脱盐,再用CM阳离子交换层析分离,最后用C18反相层析脱盐纯化,真空干燥后得到的rHWTX-Ⅰ经Tricine SDS-PAGE,质谱鉴定,氨基酸组成分析,N-端序列测定及活性鉴定,证明已获得高纯度的重组HWTX-Ⅰ,摇瓶表达量约为80mg/L,约占总分泌量的23.6%,并对摇瓶发酵条件进行了优化,为利用基因工程方法生产HWTX-I的规模化生产及临床应用提供了证据。 %K 重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅰ(rHWTXⅠ),Pichia %K ,分泌表达,分离纯化 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=69B0DD1577DE6ECF1F3011E01A1DC44A&yid=C3ACC247184A22C1&vid=13553B2D12F347E8&iid=0B39A22176CE99FB&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=3&reference_num=0