%0 Journal Article %T 表达大肠杆菌K88ac-ST1-LTB融合蛋白基因工程菌株的构建 %A 许崇波 %A 卫广森 %J 生物工程学报 %D 2002 %I %X 利用PCR技术,从大肠杆菌C83902质粒中扩增出K88ac基因、ST1突变基因和LTB基因,通过分离、纯化、内切酶酶切、连接和转化,构建了含K88ac-ST1-LTB融合基因表达载体的重组菌株BL21(DE3)(pXKST3LT5)。经酶切鉴定和DNA序列分析证实,构建的重组质粒pXKST3LT5中含有K88ac-ST1-LTB融合基因,且基因序列和阅读框架均正确。经ELISA检测,重组菌株表达的K88ac-ST1-LTB融合蛋白能够被ST1单抗、LTB和K88ac抗体识别。经乳鼠灌胃试验证实,表达的融合蛋白已丧失天然ST1肠毒素的活性。免疫实验结果表明,K88ac-ST1-LTB融合蛋白能够诱发小白鼠产生抗体,该抗体具有中和天然ST1肠毒素的毒性作用,表明构建的重组菌株可以作为预防仔猪黄、白痢基因工程菌苗的候选菌株。 %K K88ac基因,ST1基因,LTB基因,融合基因,融合蛋白,基因表达 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=3C1848E71CBD0B0153D74AA094079470&yid=C3ACC247184A22C1&vid=13553B2D12F347E8&iid=0B39A22176CE99FB&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0