%0 Journal Article
%T Studies on the Expression of the Recombinant Human GM-CSF/IL-3 Fusion Protein<br>粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-3融合蛋白的表达研究
%A ZHANG Yi
%A QU Xian-Ming
%A YANG Sheng-Li
%A <br>张毅
%A 屈贤铭
%A 杨胜利
%J 生物工程学报
%D 2000
%I 
%X 利用PCR扩增得到粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-3(IL-3)完整基因片段，将其分别克隆至pGEM-T，构建成GMCSF/IL-3融合蛋白基因，DNA序列与设计预期一致。将得到的融合蛋白基因克隆至T7RNA聚合酶表达载体pT7zz，得到表达质粒pFu，经转化至表达宿主E.coli BL21(DE3),在IPTG诱导下获得融合蛋白目的产物的直接表达。经SDS-PAGE电泳鉴定扫描分析，目的基因产物表达量占菌体总蛋白量的30%以上，目的基因表达产物以包涵体的形式表达。Westernblot鉴定表明，该表达产物可以与GM-CSF抗体及IL-3抗体特异性结合。目的基因表达产物经过包涵体变性、透析复性及柱层析纯化，用GM-CSF、IL-3依赖细胞株TF-1检测，具有明显的生物学活性。
%K Fusion protein
%K gene expression
%K haemopoietic growth factors<br>融合蛋白，
%K 基因表达，
%K 细胞因子
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=34E4B9BB3E5C2E3D33D433E032128D2A&yid=9806D0D4EAA9BED3&vid=7801E6FC5AE9020C&iid=38B194292C032A66&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=10