%0 Journal Article %T Expression of TPO Mimetic Peptide Chimeric Proteins with Human IgG1 Fc Fragments and Their Biological Characters
TPO模拟肽与人IgG1 Fc片段的融合表达及其生物学特性研究 %A 李越希 %A 李朝 %A 陶开华 %A 贾向红 %A 程度胜 %A 黄培堂 %J 生物工程学报 %D 2002 %I %X 依据本室获得的人TPO模拟肽序列,合成了该模拟肽的DNA序列,分别连接至4种不同长度的人IgG1 Fc基因片段的5′端,并克隆至质粒表达载体pET28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选获得了4种重组工程菌,其中3种分别高效表达了3种不同长度的融合蛋白,而第4种工程菌未表达。表达的3种融合蛋白的分子量分别约为28kD、12kD和12kD,表达量约占菌体蛋白总量的30%左右,纯化获得了3种TPO模拟肽融合蛋白。3种融合蛋白均有较好的体外活性,维持TPO依赖细胞Ba/F3-mp1生长的EC50分别为:13、10、10 nmol/L。用血小板减少症小鼠动物模型,测定了它们的体内活性,3种融合蛋白均有升高血小板和缩短血小板恢复时间的功能,分别比TPO模拟肽活性提高了18、8、8倍;而对白细胞及红细胞无显著影响。分别用3种融合蛋白免疫BALB/c小鼠,均未刺激小鼠产生抗TPO模拟肽抗体,并显示了较好的应用潜力。  %K 人TPO模拟肽, %K 融合表达, %K 纯化 %K 体内外活性 %K 免疫原性 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=6FE6A5DA435475FEC7196F7F77520D1F&yid=C3ACC247184A22C1&vid=13553B2D12F347E8&iid=E158A972A605785F&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0