%0 Journal Article %T 凝乳酶β-转角突变体的构建、表达和性质分析 %A 黎红晔 %A 张渝英 %A 董贻诚 %A 杨开宇 %J 生物工程学报 %D 1998 %I %X 为了阐明牛凝乳酶的第二个发夹结构中的Ⅵ型β-转角的功能,利用基因突变技术,将该转角的氨基酸残基(Leu20-Gly21-The22-Pro23-Pro24-Gln25)改为(Leu20-Gly-Gly-Gln25)、(Leu20SerGlyGln25)或(Leu20GlySerGln25),得到3个突变牛凝乳酶原表达质粒Pmcgg,Pmcsg和Pmcgs。除Pmcgs不能在大肠杆菌中表达外,Pmcgg和Pmcsg均能以包含体的形式进行表达,且表达水平与野生型相当。像野生型凝乳酶原一样,Pmcgg和Pmcsg的表达产物经过变性复性,均能自活化为假凝乳酶,而且复性后的酶原突变体在DEAESepharose CL6B上的柱行为与野生型相类似,但突变体假凝乳酶的凝乳及水解酪蛋白活性均明显低于野生型。说明突变对酶原的折叠影响较小,但对酶的催化效率影响较大。 %K 牛凝乳酶(原),β-转角,结构和功能 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=DC52FB7709E3F7C0EBA21FA55715CB96&yid=8CAA3A429E3EA654&vid=F3583C8E78166B9E&iid=CA4FD0336C81A37A&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0