%0 Journal Article %T 霍乱弧菌zot基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 %A 何志勇 %A 陈哲宇 %A 王东宁 %A 杨冠珍 %A 张惟杰 %A 吴祥甫 %J 生物工程学报 %D 2000 %I %X 从霍乱疫苗菌中抽提基因组DNA,用PCR的方法扩增zot基因。序列分析表明,zot基因编码399个氨基酸,其中4个氨基酸与文献报道有差异。将zot基因插入含T7启动子的质粒pET28(a+)构建表达质粒pET-ZOT,转化大肠杆菌BL21(DE3)筛选表达菌株BLZOT。表达菌株经1mmol/L IPTG诱导表达3~5h后,表达大量ZOT蛋白,并形成包涵体。经SDS-PAGE分析重组ZOT蛋白分子量约为47kD,凝胶自动扫描分析表明,重组ZOT约占菌体可溶性蛋白量的15%以上。本工作为进一步研究蛋白多肽类药物的口服奠定了良好的基础。 %K 封闭带毒素,克隆,表达,大肠杆菌 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=31CDDE8C2E1200CEFB0F47720FA11F6A&yid=9806D0D4EAA9BED3&vid=7801E6FC5AE9020C&iid=94C357A881DFC066&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0