%0 Journal Article
%T Cloning and Expression of Human Protein Disulfide Isomerase cDNA in Escherichia coli Supported by the Beijing Municipal Natural Science Fundation (No.5962006).<br>人蛋白质二硫键异构酶Cdna基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
%A Gao Yin
%A Yang Zhiwei
%A Hua Zhenling
%A Gao Hong
%A Wan Ping
%A Li Hongye
%A <br>高音
%A 杨志伟
%A 华振玲
%A 高虹万平
%A 黎红晔
%J 生物工程学报
%D 1999
%I 
%X 从人胚胎肝组织中分离纯化出总RNA，在总RNA中提取mRNA，经逆转录得到cDNA第一条链，并以之为模板和相应寡聚脱氧核苷酸为引物．进行PCR合成人蛋白质二硫键异构酶(Proteim disulfide isomerase，PDI)cDNA基因，将所得cDNA克隆到质粒pUCl8上，转化大肠杆菌DH5a细胞，进行诱导表达筛选和活性筛选。将筛选的基因克隆到载体pBV220上，在大肠杆菌细胞中表达，产物以溶解形式在胞浆中表达。表达产物经硫酸铵分级沉淀和DEAE Sepharose Fast Flow柱层析分离，产物的纯度与活性分别为90％、1100u／g。
%K Protein disulfide isomerase
%K gene cloning and expression<br>蛋白质二硫键异构酶，基因克隆和表达
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=B0F55D7147DB579C9DF4AD36031843F7&yid=B914830F5B1D1078&vid=23CCDDCD68FFCC2F&iid=38B194292C032A66&sid=31125890FF093250&eid=0954045FA0C6885F&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=7&reference_num=4