%0 Journal Article %T 嗜热脂肪芽孢杆菌HY-69耐热金属蛋白酶基因表达产物的纯化及性质研究 %A 孙超 %A 金城 %A 杨寿钧 %A 张树政 %J 生物工程学报 %D 1999 %I %X 利用CM纤维素离子交换层析法,从宿主细胞枯草芽孢杆菌MI113中纯化了嗜热脂肪芽孢杆菌HY69的耐热金属蛋白酶基因的表达产物,达电泳纯。该酶的最适反应温度为70℃,有着较好的热稳定性和极高的盐酸胍抗性。70℃的半寿期为45min。在3mol/L的盐酸胍中变性20min,仍残余近40%的酶活。利用凝胶过滤和SDSPAGE,测定其分子量均为27 000±1 000。通过CD光谱得知,该酶含有66%的α-螺旋,28%的β-转角,6%的无规则卷曲,无β-折叠。利用CD光谱和荧光光谱研究了该酶在盐酸胍变性过程中的构象变化,推测其主要是通过增加包装效率,减少无规则卷曲来提高酶的稳定性。 %K 耐热金属蛋白酶,纯化,酶的稳定性 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=65E056B112C47808273BCB322E10E5B6&yid=B914830F5B1D1078&vid=23CCDDCD68FFCC2F&iid=CA4FD0336C81A37A&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0