%0 Journal Article
%T Cloning, Expression, Purification and Function Research of Recombinant Human FLT3 Ligand<br>重组人FLT3配体的克隆、表达及功能鉴定
%A ZHENG Wen-Jie
%A LIU Jing-Zhong
%A L Xing
%A PEI Xue-Tao
%A SUN Zhi-Xian
%A <br>郑文婕
%A 刘敬忠
%A 吕星
%A 裴雪涛
%A 孙志贤
%J 生物工程学报
%D 2000
%I 
%X 通过克隆人FLT3配体(rhFL)基因，建立其原核高效表达系统，为大规模获得rhFL产品，促进干细胞体外扩增移植等新技术在临床的应用创造条件。分离人外周血单个核细胞，提取总RNA，采用RT-巢式PCR扩增可溶型FL基因，以双脱氧终止法进行DNA序列分析；将目的基因与pProEXHT载体连接，重组体引入大肠杆菌并在IPTG诱导下表达；亲和层析纯化表达产物，观察其刺激CD34+细胞增殖的情况。从人外周血单核细胞中克隆得到长481bp的rhFL基因，测序结果与已知人FL基因序列一致；rhFL的表达量约占菌体蛋白总量的15%，经亲和纯化纯度达90%以上；rhFL+G-CSF+EPO刺激CD34＋细胞增殖约400倍。获得了rhFL基因及其在大肠杆菌中的高效表达，初步建立了产物纯化途径，纯化后的rhFL具有较强的刺激造血干/祖细胞增殖的能力。
%K FLT3配体，原核表达，造血干细胞
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=F6D4CC9CE63EA4D705AABB441731221C&yid=9806D0D4EAA9BED3&vid=7801E6FC5AE9020C&iid=B31275AF3241DB2D&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0