%0 Journal Article
%T Construction of cDNA Library of Eimeria tenella Sporulated Oocysts<br>柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建
%A HAN Hong-Yu HUANG Bing
%A ZHAO Qi-Ping
%A <br>韩红玉
%A 黄兵
%A 赵其平
%J 生物工程学报
%D 2001
%I 
%X 用建立表达性文库的方法 ,构建了Eimeriatenella孢子化卵囊噬菌体ZAP表达性cDNA文库。首先用TRIzol试剂盒从E .tenella孢子化卵囊中提取总RNA ,再用Oligo(dT)12纤维素柱从总RNA中分离mRNA ,以mRNA为模板 ,Oligo(dT)18Linker Primer为引物 ,反转录合成cDNA第一链 ,再在DNA聚合酶Ⅰ作用下置换合成第二链cDNA。cDNA第二链合成后用PfuDNA聚合酶补平XhoⅠ位点 ,再与EcoRⅠAdapters连接 ,经XhoⅠ酶切后 ,凝胶电泳回收 500bp～4.0kp之间的cDNA片段 ,纯化后的双链cDNA与载体ZAPExpressvector连接。体外包装后得到E .tenella孢子化卵囊的cDNA表达性文库 ,经测定该文库的容量为 6×106 ,扩增后文库的滴度为 1×1011 Pfu mL ,经PCR测定 ,该文库的重组率为 96%。
%K Eimeria tenella
%K sporulated oocysts
%K cDNA library<br>柔嫩艾美耳球虫
%K 孢子化卵囊
%K cDNA文库
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=885E0DBFB121C629&yid=14E7EF987E4155E6&vid=BCA2697F357F2001&iid=B31275AF3241DB2D&sid=B10D796AE1B3FEBD&eid=B7DE0F3CA34DA149&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=2&reference_num=10