%0 Journal Article
%T Studies on High Level Expression of Recombinant Human Granulocyte Colony- stimulating Factor cDNA in Mammalian Cells
重组人粒细胞集落刺激因子Cdna在哺乳动物细胞中高效表达的研究
%A Chen Jian
%A Cao Yunxu
%A Lu Deru
%A
陈坚
%A 曹韫旭
%A 陆德如
%J 生物工程学报
%D 1998
%I
%X 利用PCR反应、DNA测序、基因重组等技术,构建了两个表达人粒细胞集落刺激因子cDNA的重组质粒pED-GCSF和pEF-GCSF,两质粒分别转染COS7细胞作瞬时表达,转染CHO-dhfr-细胞作稳定表达。结果两质粒在COS7细胞和CHO细胞均获得了表达,pED-GCSF转染COS7细胞48h、72h的表达量分别为5.2×104pg/ml和2.3×105pg/ml,pEF-GCSF转染COS7细胞后48h、72h的表达量分别为2.8×105pg/ml和1.4×105pg/ml。转染CHO-dhfr-细胞,随着加入的氨甲喋呤(MTX)浓度升高,CHO-dhfr+克隆数减少,但平均每个克隆的rhG-CSF表达量升高,在0.5μmol/L MTX下最高表达rhG-CSF细胞株的量是4.46μg/ml/3d。且表达的rhG-CSF注射小鼠腹腔可提高小鼠外周血白细胞的数量。
%K Human granulocyte colony-stimulating factor
%K gene recombination
%K mammalian cell
人粒细胞集落刺激因子,基因重组,哺乳动物细胞
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=362D5F09D03AD55C7DBC7C49BF0CAEC7&yid=8CAA3A429E3EA654&vid=F3583C8E78166B9E&iid=CA4FD0336C81A37A&sid=09ABD5535D9B6D45&eid=67969BA850333433&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=2