%0 Journal Article
%T 豇豆胰蛋白酶抑制剂cDNA在大肠杆菌中的克隆与表达
%A 刘春明
%A 朱祯
%A 周兆斓
%A 孙宝林
%A 李向辉
%J 生物工程学报
%D 1993
%I 
%X 从即将成熟的豇豆予叶中分离出总RNA，逆转录合成cDNA第一条链。参照已知的几种Bowman—Birk型胰蛋白酶抑制剂基因序列，设计并合成了两段寡核苷酸引物，以单链cDNA为模板，进行PCR扩增，得到320bp的均一扩增产物，克隆到pBluescrip sK(+)的EcoRV位点上并转化大肠杆菌JM101。酶切图谱及DNA序列分析表明克隆到的片段含有编码完整80个aa的豇豆胰蛋白酶抑制剂结构基因和一段编码27aa的前导序列。利用限制酶NcoI对其前导序列进行缺失，只保留成熟蛋白结构基因上游第一个ATG密码子并克隆到大肠杆菌表达载体pKK233—2中进行表达研究，从转化细菌的提取物中检测到了外源CpTJ基因表达产物对胰蛋白酶的抑制活力。
%K 中国科学院遗传研究所，北京100101
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=B760C3891B68B7E28017DB506995B1AC&yid=D418FDC97F7C2EBA&vid=9CF7A0430CBB2DFD&iid=0B39A22176CE99FB&sid=04445C1D2BDA24EE&eid=0B4F496D54044D86&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=25&reference_num=4