%0 Journal Article
%T 牛凝乳酶的结晶及其二硫键的化学修饰
%A 黄葵
%A 陈世芝
%A 杨开宇
%J 生物工程学报
%D 1991
%I 
%X 为了配合凝乳酶的蛋白质工程，围绕酶的纯化，结晶和二硫键的化学修饰进行了研究。实验结果表明采用FPLC Mono Q柱代替DEAE-纤维素柱层析可以提高同工酶A，B及其降解组分C的分离效果并缩短纯化时间。以10mg／ml的纯凝乳酶B为出发材料，在4℃1．4—2．0mol／L氯化钠条件下进行培养可以获得外形近似为正立方体晶体。化学修饰的结果证明，凝乳酶的三对二硫键处于酶分子不同的空间部位。0．72mmol／L DTT在Ph6．3条件下能还原处于分子表面的一对二硫键，经溴化氰降解分肽测定为Ｃys250-Cys283，还原后引起活力下降25％。在二硫键之间引入汞原子其活力与还原酶，羧甲基化酶的活力大体相同，说明Cys250-Cys283在维持凝乳酶具有活力的空间构象中起着一定的作用。
%K 牛凝乳酶
%K 二硫键
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=A888D69F4E58C5D6D423A63CCAC912E4&yid=116CB34717B0B183&vid=DF92D298D3FF1E6E&iid=CA4FD0336C81A37A&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0