%0 Journal Article %T 人尿激酶原全长cDNA在中国仓鼠卵巢细胞中的稳定表达 %A 李风知 %A 李秀珍 %A 唐宏娣 %A 张宏权 %A 胡宝成 %A 韩素文 %A 俞炜源 %A 方继明 %A 黄翠芬 %J 生物工程学报 %D 1991 %I %X 通过磷酸钙共沉淀技术,将含有尿激酶原cDNA的表达载体(pSV2-PrUK)与含有二氢叶酸还原酶基因的表达质粒pSV2-dhfr-或MMTV—dhfr共转染中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶基因缺陷株(CHO-dhfr-)。利用选择培养基选择出二氧叶酸还原酶基因表达阳性(dhfr+)的转化细胞灶。用溶解圈法测定尿激酶型纤溶酶原激活剂(u—PA)的生物活性,其中两株显著高于其他株细胞,命名为CLF-14和CLF-8,表达水平依次为24Iu/106细胞/48h,16Iu/106细胞/48h。用ELLSA测定CLF一14和cLF-8细胞上清,表现为强阳性,阳性值比阴性对照值(P/N)大于10,CLF-14和CLF-8细胞表达量分别为0.14-o.22μg/106细胞/48h和0.08-O.14μg/106细胞/48h。分泌产物能被抗尿激酶(UK)血清抑制,而不被抗组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)的抗血清和正常兔血清抑制。 %K 尿激酶原cDNA %K CHO-dhfr-细胞 %K 基因表达 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=4658374955C702848C8EFB33BFA48087&yid=116CB34717B0B183&vid=DF92D298D3FF1E6E&iid=0B39A22176CE99FB&sid=DDD31293A7C7D057&eid=EFD65B51496FB200&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=8&reference_num=6