%0 Journal Article %T 青霉素酰化酶基因的克隆与表达Ⅱ 质粒pPAl的限制性酶切图及青霉素酰化酶基因的定位 %A 吴汝平 %A 杨胜利 %A 姜增连 %A 冯一民 %A 杨莉娟 %A 张继宝 %J 生物工程学报 %D 1985 %I %X 前文报道重组质粒pPAl中9.1kb的EcoRI片段上带青霉酰化酶基因。用16种限制性内切酶消化pPAl,其中ApaI,KpnI,SacI,SacI,SmaI及XhoI等六种内切酶在pPAl上无切口; BamHI,ClaI,Sph I,BglI为单切口;Sal为双切口,AvaI,HindI及PvuI为三切口,EcoRV为五切口。经交叉双酶解法测定各片段的大小,作出质粒pPAl的限制性酶切图。在包含青霉素酰化酶基因的9.1kbEcoRI片段上,BglI有一个切口,AvaI,HindI 及PvuI都有两个切口,而EcoRV有四个切口,SalI,BamHI,ClaIKSphI不切9.1kb的EeoR I片段。HindI切9.1kb EcoR I片段为A(3.5kb),B(2.7kb)及C(2,9kb)等三个片段。经Hind I部分水解后连接,转化大肠杆菌HB101得到一系列带不同Hind 1片段的质粒的转化子,青霉素酰化酶活性测定证明其基因位于Hin d II—A片段上。合成青霉素酰化酶仍需苯乙酸诱导,并被葡萄糖阻遏,Hind I—B片段的存在能增加青霉素酰化酶基因的表达,而c片段无显著影响。 %K 青霉索酰化酶,限制性酶切图,基因定位 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=D22C734244DAC60E8F25DFFAD84A9A58&yid=74E41645C164CD61&vid=CA4FD0336C81A37A&iid=38B194292C032A66&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=5&reference_num=0