%0 Journal Article %T rnc基因的高表达及核糖核酸酶Ⅲ的纯化 %A 陈苏民 %A Court.D.L %J 生物工程学报 %D 1992 %I %X 根据大肠杆菌中核糖核酸酶Ⅲ(RnaseⅢ)含量很低的原因是RnaseⅢ能作用于自身基因(rmc)转录物5’端、负反馈调控其自身合成,设计RnaseⅢ高表达的方案。去除rnc基因5’侧能转录生成可被RnaseⅢ降解的RNA结构的序列,保留整个rnc基因及其5’侧的天然翻译起始序列,将之置于λPL启动子控制下,所构建的质粒在大肠杆菌中经诱导后高表达出:RnaseⅢ,其含量达细胞总蛋白质量的65%以上,并在菌体内形成包涵体。利用RnaseⅢ溶解度变化的特点,在低温、低盐条件中裂菌,并洗涤沉淀,在室温、高盐条件下溶解、过Q-sepharose FF柱,获得具有良好活性、电泳纯的RnaseⅢ,收获量为10-12mg/100ml培养液。同时还发现RnaseⅢ具有特异性结合ATP的活性。 %K 棱糖核酸酶Ⅲ %K rnc基因 %K 基因表达 %K 蛋白质纯化 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=A66E90C274451689E69F6F0291467824&aid=3E4322906F4B46A73BE19C44AB101825&yid=F53A2717BDB04D52&vid=5D311CA918CA9A03&iid=0B39A22176CE99FB&journal_id=1000-3061&journal_name=生物工程学报&referenced_num=0&reference_num=0