%0 Journal Article %T Cloning and analysis of PKS gene from Prorocentrum lima
利玛原甲藻中聚酮合酶基因克隆与分析 %A TANG Jing-Qian %A LI Ting %A YANG Wei-Dong %A LIU Jie-Sheng %A LI Hong-Ye %A
汤敬谦 %A 李挺 %A 杨维东 %A 刘洁生 %A 李宏业 %J 生态学报 %D 2009 %I %X 为探讨聚酮合酶 (polyketide synthase, PKS)基因与藻毒素合成的关系,揭示PKS基因在赤潮毒素合成中的作用,采用兼并引物,通过PCR技术获得利玛原甲藻(Prorocentrum lima)可能存在的I型PKS基因;并对所获得PKS基因的同源性进行了分析,构建了基于PKS氨基酸序列的系统进化树;采用RT-PCR技术分析了PKS基因在利玛原甲藻中的表达状况;并通过多聚腺苷酸RNA的扩增、细菌的分离鉴定、限制性内切酶酶切、Southern blotting等技术对PKS基因进行了分析.结果表明,利玛原甲藻中PKS基因与海洋原甲藻聚为一支,在利玛原甲藻中有显著表达;以Oligo(T)引物进行RT-PCR扩增时,可出现18S rRNA和PKS基因相应条带;限制性内切酶酶切和Southern blotting结果显示,该基因中存在明显的甲基化;16S rRNA基因序列分析显示,从利玛原甲藻培养液中分离到的细菌与海洋放线菌假诺卡氏菌属(Pseudonocardia)基因序列同源性达到99%,该菌株中并不存在PKS基因.结果显示,所获得的PKS基因是利玛原甲藻聚酮合酶基因,基因序列已提交GenBank (EF521601);PKS可能在腹泻性贝毒合成中起着关键作用. %K Prorocentrum lima %K polyketide synthases %K clone
利玛原甲藻 %K 聚酮合酶 %K 基因克隆 %K 分子杂交 %U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=FE163E5DB2274E5937319DE98913EC37&aid=CC249692BA48B58404EFAB4CF4E4EE96&yid=DE12191FBD62783C&vid=771469D9D58C34FF&iid=94C357A881DFC066&sid=76CE0C8B87EE0D79&eid=764CFDBFE956EAB0&journal_id=1000-0933&journal_name=生态学报&referenced_num=1&reference_num=21