%0 Journal Article
%T Preparation and applications of monoclonal antibody against the pathogenic Harveyi from Pseudosciaena crocea
大黄鱼病原哈维氏弧菌单克隆抗体的制备及其应用
%A HAO Gui-Jie
%A SHEN Jin-Yu
%A XU Yang
%A YAO Jia-Yun
%A PAN Xiao-Yi
%A YIN Wen-Lin
%A
郝贵杰
%A 沈锦玉
%A 徐 洋
%A 姚嘉赟
%A 潘晓艺
%A 尹文林
%J 水生生物学报
%D 2009
%I
%X 用甲醛灭活哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)GYC1108-1制备免疫原免疫8周龄雌性BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)对杂交瘤进行筛选,阳性克隆经2-3次亚克隆后,共获得5株针对GYC1108-1的单克隆抗体。选取1B7制备小鼠腹水抗体,其细胞上清及腹水效价分别为1∶3200和1∶32000。同样用灭活的哈维氏弧菌免疫新西兰大白兔,5次免疫后颈动脉采血,离心取血清,并用饱和硫酸铵法进行纯化,制备了兔抗哈维氏弧菌多克隆抗体,其ELISA效价为1∶51200。利用1B7单克隆抗体和兔抗哈维氏弧菌多克隆抗体以及山羊抗小鼠HRP酶标二抗,建立了检测哈维氏弧菌的三抗体夹心酶联免疫吸附试验(TAS-ELISA)方法。该方法对哈维氏弧菌的最小检出浓度为1×104个/mL。用该TAS-ELISA方法检测大黄鱼(Pseudosciaena crocea)样品,54尾患病大黄鱼中有45尾检出哈维氏弧菌,而14尾健康大黄鱼都没有检出哈维氏弧菌。由此可见,本试验建立的TAS-ELISA方法,可以用于患病大黄鱼哈维氏弧菌的快速诊断。
%K Pseudosciaena crocea
%K Vibrio harveyi
%K Monoclonal antibody
%K TAS-ELISA
大黄鱼
%K 哈维氏弧菌
%K 单克隆抗体
%K 三抗体夹心酶联免疫吸附试验
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=256651267D5D2E4520A7707D05E98747&aid=1347C8137BC51E0840FFF8984FFDE6C6&yid=DE12191FBD62783C&vid=27746BCEEE58E9DC&iid=38B194292C032A66&sid=CA4FD0336C81A37A&journal_id=1000-3207&journal_name=水生生物学报&referenced_num=1&reference_num=18