%0 Journal Article
%T MOLECULAR CLONING AND IN VIVO EXPRESSION ANALYSIS OF MICROCYSTIN DETOXIFICATION-RELATED GENES IN NILE TILAPIA (OREOCHROMIS NILOTICUS)<br>罗非鱼微囊藻毒素去毒相关基因克隆与活体表达研究
%A WANG Lin
%A LIANG Xu-Fang
%A LIAO Wan-Qin
%A LEI La-Mei
%A HAN Bo-Ping
%A <br>王琳
%A 梁旭方
%A 廖婉琴
%A 雷腊梅
%A 韩博平
%J 水生生物学报
%D 2007
%I 
%X 可溶性谷胱甘肽S-转移酶(Soluble glutathione S-transferase,sGST)催化微囊藻毒素(Microcystins,MCs)与还原型谷胱甘肽(GSH)的加合去毒代谢过程,谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPX)为sGST的去毒反应提供GSH,解偶联蛋白2(Uncoupling protein 2,UCP2)则可抑制微囊藻毒素诱发活性氧导致的肝细胞凋亡。本研究从罗非鱼肝脏通过简并引物克隆sGST、GPX与UCP2基因cDNA核心序列,并应用5’RACE和3’RACE技术分别扩增罗非鱼肝脏sGST基因cDNA序列5’末端和3’末端序列而获得其cDNA全序列。罗非鱼肝脏sGST基因cDNA全序列长861 bp,其中5’非翻译区(5-’UTR)为25 bp,3’非翻译区(3-’UTR)为167 bp,开放阅读框(ORF)为669 bp,编码222个氨基酸,包含脊椎动物完整sGST的2个功能域:N-末端功能域(GSH结合位点)和C-末端功能域(底物结合位点)。罗非鱼sGST与真鲷、条石鲷(Oplegnathus fasciatus)、斑马鱼同源性较高,达到64.3%—78.5%,而与人、大鼠、小鼠、牛、猪、鸡差异较大,氨基酸同源性为48.2%—55.9%。罗非鱼肝脏GPX、UCP2基因cDNA核心序列长280 bp、776 bp,分别编码92、258个氨基酸。罗非鱼GPX与条石鲷、虹鳟、斑马鱼、人、大鼠、小鼠、牛、猪GPX同源性均较高,达到69.6%—85.9%。罗非鱼UCP2与真鲷、斑马鱼、鲤鱼、欧洲白鲑(Leuciscus cephalus)、草鱼、人、大鼠、小鼠UCP2同源性更高,达到71.8%—93.8%。通过对罗非鱼(5—8 g)活体腹腔注射亚致死量MC-LR(50μg/kg bwt),发现微囊藻毒素对罗非鱼肝脏sGST基因表达有显著的诱导作用(p<0.05),注射微囊藻毒素24h后sGST基因mRNA表达水平上调80%。注射微囊藻毒素24h后,虽然罗非鱼肝脏GPX与UCP2基因mRNA表达水平亦出现明显的升高趋势,但两者均未出现显著性的变化(p>0.05)。本研究从基因表达调控的角度证实,罗非鱼肝脏sGST在微囊藻毒素去毒过程中可能发挥关键作用,同时也说明罗非鱼肝脏GPX、UCP2基因可能在微囊藻去毒
%K Nile tilapia(Oreochromis niloticus)
%K Soluble Glutathione S-transferase(sGST)
%K Glutathione peroxidase(GPX)
%K Uncoupling protein 2(UCP2)
%K Molecular cloning
%K In vivo induced expression
%K Microcystins(MCs)<br>罗非鱼
%K 可溶性谷胱甘肽S-转移酶
%K 谷胱甘肽过氧化物酶
%K 解偶联蛋白2
%K 分子克隆
%K 活体诱导表达
%K 微囊藻毒素
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=256651267D5D2E4520A7707D05E98747&aid=DD2141DE2C3CADA631EDAF6CD0BB2A93&yid=A732AF04DDA03BB3&vid=4AD960B5AD2D111A&iid=B31275AF3241DB2D&sid=CA4FD0336C81A37A&eid=B3645A659773B73C&journal_id=1000-3207&journal_name=水生生物学报&referenced_num=0&reference_num=21