%0 Journal Article %T 猪表皮生长因子在植物乳杆菌中的表达及其活性检测 %A 钟泽民? %A 赖强? %A 余希尧? %A 刘德辉? %A 黄毓茂? %J 生物工程学报 %P 1325-1334 %D 2015 %R 10.13345/j.cjb.140544 %X 为获得一株高效表达猪表皮生长因子(pegf)的重组植物乳杆菌,并检测其生物活性,从仔猪肠道内容物中分离植物乳杆菌,选择其中生物活性最强的一株(lp-1)为宿主。以商品化乳杆菌表达载体piaβ8为骨架,干酪乳杆菌超强组成型启动子scp、m6前体蛋白信号肽sp、猪表皮生长因子pegf等为元件,构建表达pegf的植物乳杆菌重组表达载体pscpse。用电转化方法(2.0kv,2000ω,25μf,4.0ms)将重组载体pscpse转化入宿主菌lp-1中获得重组植物乳杆菌lp-pscpse。以tricine-sds-page法和pegfelisa特异性检测试剂盒检测目的蛋白的表达;用培养12h的阳性转化子菌体给刚断奶的balb/c小鼠灌胃,2次/天,连续10d,以断奶小鼠的体重、肠绒毛长度和隐窝深度的变化为指标,检测目的蛋白的生物活性。tricine-sds-page检测和小鼠实验结果显示,重组植物乳杆菌的培养上清中出现6kda左右pegf的特异性条带,且表达pegf的重组植物乳杆菌能显著增加(p<0.05)断奶小鼠的体重、肠绒毛高度和肠隐窝深度。以上结果表明,pegf能在植物乳杆菌中成功表达,且具有良好的生物学活性。 %K 猪源乳酸杆菌 %K 猪表皮生长因子 %K (pegf) %K 断奶小鼠 %K 绒毛高度 %K 隐窝深度 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc15091325&flag=1