%0 Journal Article
%T 禽网状内皮组织增殖病病毒gp90蛋白单克隆抗体的制备及其识别区分析
%A 孙明铭？
%A 李晓齐？
%A 曹红？
%A 王永强？
%A 郑世军？
%J 生物工程学报
%P 75-85
%D 2015
%R 10.13345/j.cjb.140225
%X 为了制备禽网状内皮组织增殖病病毒(rev)gp90蛋白的单克隆抗体，应用his-gp90融合蛋白免疫balb/c小鼠，取免疫鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(sp2/0)进行融合，经过筛选、3次亚克隆后获得3株稳定分泌抗rev-gp90蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株，分别命名为3g5-b8、3g5-a10和1g12。经间接elisa(enzyme-linkedimmunosorbentassay)方法检测，单克隆抗体的亲和力解离常数(kd)分别为6.483×10–10、4.844×10–10和9.330×10–10，3株单抗的亚型分别为igg1、igg1和igg2b。经westernblotting和间接免疫荧光实验检测，3株单抗均能识别rev感染df-1细胞后产生的gp90蛋白。以westernblotting方法利用单抗检测不同截短的gp90蛋白，初步确定3g5-b8和3g5-a102株单抗抗原识别区均位于gp90蛋白第200?245位氨基酸，而1g12株单抗识别区包含第230?235位氨基酸。这些单抗为rev的诊断和致病机理研究奠定了基础。
%K 禽网状内皮组织增殖病病毒
%K gp90蛋白
%K 单克隆抗体
%K 亲和力
%K 抗原表位
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc15010075&flag=1