%0 Journal Article
%T Cloning, expression and characterization of a thermostable chitinase from Thermoascus aurantiacus var. aurantiacus<br>嗜热子囊菌原变种Thermoascus aurantiacus var. aurantiacus热稳定几丁质酶的克隆表达及活性研究
%A ZHANG Jie
%A XIE Chen
%A GUO Xiao-Hong
%A LI Duo-Chuan
%A <br>张婕
%A 谢晨
%A 郭晓红
%A 李多川
%J 菌物学报
%D 2010
%I 
%X 研究通过RT-PCR和Tail-PCR技术从嗜热子囊菌原变种Thermoascus aurantiacus var. aurantiacus中克隆了一个几丁质酶同源基因。该基因全长1,253bp，包含一个由1,197个碱基构成的开放阅读框，编码398个氨基酸。序列比对分析表明，该基因编码蛋白属于糖苷水解酶18家族的几丁质酶。利用基因重组的方法构建酵母分泌型表达载体，并转化毕赤酵母。在甲醇的诱导下，重组蛋白得到了高效表达，第6天的表达量最高，达到0.433g/L，酶活力为28.96U/mg，同时对表达的几丁质酶进行了纯化，SDS-PAGE检测该蛋白的分子量为43.9kDa。该几丁质酶的最适反应温度为60℃，最适反应pH值为8.0，70℃处理30min仍有45%的相对酶活，具有较好的热稳定性及工业应用价值。
%K chitin
%K thermophilic fungi
%K thermostable enzymes
%K gene encoding
%K Pichia pastoris<br>几丁质，嗜热真菌，嗜热酶，编码基因，毕赤酵母
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=90BA3D13E7F3BC869AC96FB3DA594E3FE34FBF7B8BC0E591&jid=CA9F815FCB0F62294C4266BB6F902ACB&aid=A71BEEA5472F24B7F7CA50737074EA4B&yid=140ECF96957D60B2&vid=771469D9D58C34FF&iid=94C357A881DFC066&sid=09F7C8D609E885AE&eid=780091CB32840698&journal_id=1672-6472&journal_name=菌物学报&referenced_num=0&reference_num=33