%0 Journal Article
%T Soluble expression of recombinant cyclophilin A in Escherichia coli
重组亲环蛋白A的可溶性表达
%A YAN Xiao
%A XU Li-ren
%A GUAN Yi-xin
%A YAO Shan-jing
%A
闫啸
%A 徐立仁
%A 关怡新
%A 姚善泾
%J 浙江大学学报(农业与生命科学版)
%D 2010
%I Zhejiang University Press
%X 为获得高表达量的可溶亲环蛋白A(cyclophilin A,CypA),对重组CypA质粒表达和工程菌的培养过程进行研究.首先将pRSET-CypA质粒转入Escherichia coli BL21菌株,获得表达CypA的重组工程菌;然后以2×YT为基本培养基,对培养基组成包括碳源、氮源和氨苄青霉素浓度进行优化,并考察接种量和诱导条件(诱导剂浓度、诱导时机、诱导后培养时间)等对目标蛋白表达量的影响.结果表明:通过控制培养温度和转速可大大减少CypA包涵体的量;以甘露醇为碳源能显著提高目标蛋白的表达量;优化的培养基组成为蛋白胨16 g·L-1,酵母提取物10 g·L-1,NaCl 5 g·L-1,甘露醇10 g·L-1,Amp 50 mg·L-1;在对数生长期中期OD600为1.3时加入1 mmol·L-1 IPTG诱导,然后在30 ℃、180 r·min-1条件下继续培养9 h收获菌体;优化后目标蛋白CypA产量为66.7 mg·L-1发酵液,与优化前相比提高了76.6%.
%K 亲环蛋白A
%K 可溶表达
%K 培养优化
%U http://www.alljournals.cn/get_abstract_url.aspx?pcid=03F54A49DE00578AA0E5DDF5BC021AA7&cid=298920A27C9BAA22346FCA384240FAA4&jid=466C05D88593309B3EB5CF34361E6426&aid=EF4AF7B581A5F000E630152B0AD06D0A&yid=140ECF96957D60B2&vid=933658645952ED9F&iid=E158A972A605785F&sid=8C27CCA578E52082&eid=F7BB24011DC0D223&journal_id=1008-9209&journal_name=浙江大学学报(农业与生命科学版)&referenced_num=0&reference_num=15