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Purificación de anticuerpos naturales anti banda 3 de la clase IgG
Merlín Linares,Julio César; Villaescusa Blanco,Rinaldo; Arce Hernández,Ada Amalia;
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2007,
Abstract: natural anti-band 3 igg antibodies were purified by affinity chromatography with an acceptable level of purity, rapidity and efficiency, starting from a mixture of human immunoglobulins of paren teral use. the attainment of these natural anti-band 3 antibodies will allow further studies on their possible participation and therapuetic potential in the phenomenon of drepanocytosis vasoocclusion
Purificación de la proteína banda 3 de eritrocitos humanos (AE 1)
Arce Hernández,Ada Amalia; Villaescusa Blanco,Rinaldo; Merlín Linares,Julio César;
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2007,
Abstract: the band 3 protein is purified starting form the membranes of human erythrocytes with celerity and efficiency by a combination of deae-cellulose ion-exchange and affinity chromatography by using a pcmb-sepharose column. the obtention of band 3 will allow to investigate its possible participation in the occlusive phenomena in drepanocytosis
Ensayo inmunoenzimático para la determinación de anticuerpos naturales anti banda 3
Arce Hernández,Ada Amalia; Villaescusa Blanco,Rinaldo; Merlín Linares,Julio César;
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2008,
Abstract: an immunoenzimatic assay (elisa) was standardized to determine the natural anti-band 3 antibodies by coupling with chemobond plates the band 3 protein obtained from the membrane of human erythrocytes by a combination of affinity and anion exchange chromatography. 3 g of band 3 protein per well were used. a level of detection of 1 g/ml of anti-band 3 antibody was achieved. the results showed the usefulness of the method to measure the levels of natural anti-band 3 antibodies in patients with drepanocytes, both in basal state and in the painful vasocclusive crises.
Purificación de la proteína banda 3 de eritrocitos humanos (AE 1) Purification of band 3 protein from human erythrocytes (AE 1)
Ada Amalia Arce Hernández,Rinaldo Villaescusa Blanco,Julio César Merlín Linares
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2007,
Abstract: Se purifica la proteína banda 3 a partir de membranas de eritrocitos humanos con rapidez y eficiencia, mediante una combinación de cromatografía de intercambio iónico en DEAE-celulosa y de afinidad mediante el empleo de una columna pCMB-Sepharose. La obtención de banda 3 permitirá investigar su posible participación en los fenómenos oclusivos en la drepanocitosis The band 3 protein is purified starting form the membranes of human erythrocytes with celerity and efficiency by a combination of DEAE-cellulose ion-exchange and affinity chromatography by using a pCMB-Sepharose column. The obtention of band 3 will allow to investigate its possible participation in the occlusive phenomena in drepanocytosis
Purificación de anticuerpos naturales anti banda 3 de la clase IgG Purification of natural anti-band 3 IgG antibodies
Julio César Merlín Linares,Rinaldo Villaescusa Blanco,Ada Amalia Arce Hernández
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2007,
Abstract: Se purificaron anticuerpos naturales anti banda 3 de la clase IgG mediante cromatografía de afinidad con un aceptable nivel de pureza, rapidez y eficiencia, a partir de una mezcla de inmunoglobulinas humanas de uso parenteral. La obtención de estos anticuerpos naturales anti banda 3 permitirá abordar estudios posteriores acerca de su posible participación y potencial terapéutico en el fenómeno de vasooclusión en la drepanocitosis Natural anti-band 3 IgG antibodies were purified by affinity chromatography with an acceptable level of purity, rapidity and efficiency, starting from a mixture of human immunoglobulins of paren teral use. The attainment of these natural anti-band 3 antibodies will allow further studies on their possible participation and therapuetic potential in the phenomenon of drepanocytosis vasoocclusion
Ensayo inmunoenzimático para la determinación de anticuerpos naturales anti banda 3 Immunoenzimatic assay to determine the natural anti-band 3 antibodies
Ada Amalia Arce Hernández,Rinaldo Villaescusa Blanco,Julio César Merlín Linares
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2008,
Abstract: Se estandarizó un método inmunoenzimático (ELISA) para la determinación de anticuerpos naturales anti banda 3 acoplando a placas Chemobond la proteína banda 3 obtenida a partir de la membrana de eritrocitos humanos mediante una combinación de cromatografía de intercambio aniónico y afinidad. Se emplearon 3 mg de la proteína banda 3 por pozo, lográndose un nivel de detección de 1 mg/mL de anticuerpo anti banda 3. Los resultados indican la utilidad del método para su empleo en la medición de los niveles de anticuerpos naturales anti banda 3 en pacientes con drepanocitosis, tanto en estado basal como en las crisis vasooclusivas dolorosas. An immunoenzimatic assay (ELISA) was standardized to determine the natural anti-band 3 antibodies by coupling with Chemobond plates the band 3 protein obtained from the membrane of human erythrocytes by a combination of affinity and anion exchange chromatography. 3 g of band 3 protein per well were used. A level of detection of 1 g/mL of anti-band 3 antibody was achieved. The results showed the usefulness of the method to measure the levels of natural anti-band 3 antibodies in patients with drepanocytes, both in basal state and in the painful vasocclusive crises.
Alteraciones del sistema complemento en pacientes con anemia drepanocítica en estado basal Alterations of the complement system in patients with basal sickle cell anemia
Rinaldo Villaescusa Blanco,Ada A Arce Hernández,Orlando Serrano Barrera,Julio C Merlín Linares
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2001,
Abstract: Se determinó la actividad de las vías clásica y alternativa del complemento, así como la cuantificación de algunos de sus componentes en 46 pacientes con anemia drepanocítica (AD) (hemoglobina SS), 21 sin complicaciones clínicas y 25 con estas; entre las más frecuentes encontramos: número de infecciones, úlceras maleolares, crisis vasooclusivas, hepáticas y aplásticas, considerando como límite un a o anterior a la toma de muestra de sangre. Se demostró una disminución significativa de la actividad de la vía alternativa, factor B y del componente C3 en el grupo de pacientes con complicaciones clínicas. Se observó una correlación significativa entre el número de crisis vasooclusivas e infecciones y la actividad de la vía alternativa, el factor B y el C3. Estos resultados sugieren que los fenómenos inflamatorios que pueden persistir en pacientes con AD en estado basal, fundamentalmente aquellos con historia anterior de complicaciones clínicas, pueden provocar alteraciones en la actividad del complemento The activity of the classic and alternative complement pathways, as well as the quantitation of some of their components was determined in 46 patients with sickle cell anemia (haemoglobin SS), 21 with no clinical complications and 25 with them. Among the most frequent complications we found: number of infections, malleolar ulcers, and vaso-occlusive, hepatic and aplastic crises. A year previous to the blood sample taking was considered as the limit. A significant reduction of the activity of the alternative pathway, factor B and component C3 was proved in the group of patients with clinical complications. A marked correlation was observed between the number of vaso-occlusive crises and infections and the activity of the alternative pathway, factor B and complement C3. These results suggest that the inflammatory phenomena that may persist among patients with basal sickle cell anemia, mainly those with prior history of clinical complications, may produce alterations in the complement activity
Obtención de un preparado del componente C1 (q,r,s) del sistema complemento
Merlín Linares,Julio C; Villaescusa Blanco,Rinaldo; Arce Hernández,Ada A; Guerreiro Hernández,Ana M;
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2002,
Abstract: a concentrated preparation of component c1 (q,r,s) of the complement system in an inactive form was obtained by a precipitation method, free of contamination with the rest of the initial components of the classical pathway, that is, c2 and c4. this preparation remained stable at 2°c and in the functional assays, it was able to bind to complex eac4, to activate components c2 and c4 to form convertase c3 and cause lysis of these cells. hemolysis reaction was activated by c2 and inhibited by c1 inhibitor, which indicates the specificity of the obtained c1. this preparation can be used to attain a specific antiserum to obtain subcomponents c1q, c1r and c1s or to standardize the functional methods of study of c1, c2 and c1 inhibitor
Alteraciones de la solubilización e inhibición de la precipitación de inmunocomplejos en la anemia drepanocítica Alterations of the solubilization and inhibition of the precipitation of immunocomplexes in sickle cell anemia
Julio C Merlín Linares,Rinaldo Villaescusa Blanco,Ada A Arce Hernández,Ana M Guerreiro Hernández
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2003,
Abstract: Se estudiaron los fenómenos de solubilización e inhibición de la precipitación de inmunocomplejos en un grupo de 39 pacientes con anemia drepanocítica en crisis hepática (13) y en estado basal (26), utilizando como modelo el complejo125 I-toxoide tetánico/anti-toxoide tetánico. La inhibición de la precipitación estuvo disminuida en la crisis hepática y en el estado basal, con valores normales de la actividad hemolítica de la vía clásica y de los niveles séricos del C4, mientras que la disminución de la solubilización en la crisis hepática estuvo relacionada con una disminución de la actividad hemolítica de la vía alternativa, la actividad hemolítica del factor B y los niveles del componente C3, y con un aumento de los inmunocomplejos circulantes. Nuestros resultados sugieren la posible utilidad de estos mecanismos para evaluar otras funciones del complemento, no detectadas mediante una determinación de la actividad hemolítica, como medida de la función de las vías clásica y alternativa The phenomena of solubilization and inhibition of the precipitation of immunocomplexes were studied in a group of 39 patients with sickle cell anemia in hepatic crisis (13) and in basal state (26), using as a model the tetanus toxoid/anti-tetanus toxoid complex125 I. The inhibition of the precipitation was reduced in the hepatic crisis and in the basal state with normal values of the haemolytic activity of the classical pathway and of the serum levels of C4, whereas the reduction of the solubilization in the hepatic crisis was related to a lowering of the haemolytic activity of the alternative pathway, the haemolytic activity of factor B and the levels of component C3, and to an increase of the circulating immunocomplexes. Our results suggest the possible usefulness of these mechanisms to evaluate other functions of the complement not detected by a determination of the haemolytic activity, as a measure of the function of..the classical and alternative pathways
Alteraciones del sistema complemento en pacientes con nefropatía diabética Alterations of the complement system in patients with diabetic nephropathy
Julio C Merlín Linares,Rinaldo Villaescusa Blanco,Luz M Morera Barrios,Ana M Guerreiro Hernández
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2003,
Abstract: Se determinó la actividad del sistema complemento en 26 pacientes adultos que se hallaban en la fase terminal de la nefropatía diabética. En estos pacientes se observó una disminución significativa (p<0,001) de la actividad hemolítica de la vía clásica, de los niveles séricos del subcomponente Clq y de los niveles séricos del componente C4. Por el contrario, la actividad hemolítica de la vía alternativa, la actividad hemolítica del factor B y los niveles séricos del componente C3, se mantuvieron dentro del rango normal. Estos resultados sugieren que la disminución prolongada de alguno de los componentes iniciales de la vía clásica del complemento, puede constituir un factor que predispone a estos pacientes para los procesos autoinmunes, o que puede contribuir al mantenimiento del estado de autoinmunidad The activity of the complement system was determined in 26 adult patients that were suffering from end-stage diabetic nephropathy. In these patients, it was observed a significant reduction (p<0.001) of the haemolytic activity of the classical pathway, of the serum levels of the subcomponent Clq and of the serum levels of the component C4. However, the haemolytic activity of the alternative pathway, the haemolytic activity of factor B and the serum levels of component C3 were within the normal range. These results suggest that the prolonged decrease of some of the initial components of the classical pathway of the complement may be a factor that predisposes these patients for the autoimmune processes, or that may contribute to the maintenance of the autoimunity state
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