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Caracterización fenotípica de las células madre de médula ósea utilizadas en la terapia celular regenerativa Phenotypic characterization of the bone marrow stem cells used in regenerative cellular therapy
Consuelo Macías-Abraham,Lázaro O del Valle-Pérez,Aymara Baganet-Cobas,Elvira Dorticós-Balea
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2011,
Abstract: La Medicina Regenerativa es una novedosa terapéutica de amplio potencial en diferentes enfermedades para la cual se utilizan células madre procedentes de la médula ósea (MO), cuya caracterización fenotípica es limitada. En nuestro trabajo se estudió la expresión de diferentes marcadores de la membrana celular en células mononucleares (CMN) de la MO de 14 pacientes a quienes se les realizó terapia celular autóloga, obtenidas por punción medular y movilización a la sangre periférica, con el objetivo de caracterizar los diferentes tipos de células presentes en esta población celular heterogénea e identificar las moléculas de adhesión implicadas en su adhesión. Se observó mayor presencia de células madre adherentes del estroma medular en las CMN obtenidas directamente de la MO; una mayor población de células CD90+ en las CMN procedentes de sangre periférica CD34-/CD45- con una elevada expresión de las moléculas CD44 y CD62L, lo que sugiere mayor presencia de células madre mesenquimales (CMM) en las células movilizadas del estroma medular. Los valores más elevados de células CD34+ en las células madre procedentes de sangre periférica con baja expresión de las moléculas CD117- y DR- sugiere la presencia de células madre hematopoyéticas, hemangioblastos y células progenitoras endoteliales movilizadas a la circulación periférica. Se demostró que tanto las CMN procedentes de MO como de sangre periférica, muestran una elevada expresión de células madre con expresión de la molécula de adhesión CD44 (marcador de CMM), probablemente implicadas en su migración, asentamiento y diferenciación. Regenerative medicine is a novel therapeutic method with broad potential for the treatment of various illnesses, based on the use of bone marrow (BM) stem cells, whose phenotypic characterization is limited. The paper deals with the expression of different cell membrane markers in mononuclear BM cells from 14 patients who underwent autologous cell therapy, obtained by medullary puncture and mobilization to peripheral blood, with the purpose of characterizing the different types of cells present in that heterogeneous cellular population and identifying the adhesion molecules involved in their adhesion. A greater presence was observed of adherent stem cells from the marrow stroma in mononuclear cells obtained directly from the BM; a larger population of CD90+ cells in mononuclear cells from CD34-/CD45- peripheral blood with a high expression of molecules CD44 and CD62L, which suggests a greater presence of mesenchymal stem cells (MSC) in mobilized cells from the marrow stroma. The
Estudio de la compatibilidad por métodos serológicos (HLA) y celulares (CML) en 22 a?os de trabajo en el Instituto de Hematología e Inmunología
Morera Barrios,Luz M; Ustáriz García,Catalino R; Guerreiro Hernández,Ana M; del Valle Pérez,Lázaro O; Macías Abraham,Consuelo; Paradoa Pérez,Marta; Dorticós Balea,Elvira;
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2003,
Abstract: compatibility study by serological (hla) and cellular methods (mlc) during 22 years of work at the institute of hematology and immunology the histocompatibility of the loci abc and of the locus d of the main histocompatibility system was studied by the serological techniques of microlymphocytoxicity in 383 patients with different hematological diseases. a comparison was made in 39 of the 145 identical individuals for the hla antigens obtained from the family studies conducted at the institute of hematology and immunology by using the cellular technique and the lymphocytary reactivity in the mixed lymphocyte culture (mlc). 29 mlc proved to be negative, accounting for 74.35 %. there was not a 100 % correspondance between the serological and cellular studies, since it was not compatibilized in all cases for class ii hla antigens and in no case for the minor histocompatibility antigens that influence on the results of the mlc and on the causes of the failure of bone marrow transplantation (bmt) in identical individuals. this confirms the importance of the typing studies of molecular biology and minor histocompatibility antigens
Estudio de la compatibilidad por métodos serológicos (HLA) y celulares (CML) en 22 a?os de trabajo en el Instituto de Hematología e Inmunología
Morera Barrios,Luz M; Ustáriz García,Catalino R; Guerreiro Hernández,Ana María; del Valle Pérez,Lázaro O; Macías Abraham,Consuelo; Paradoa Pérez,Marta; Dorticós Balea,Elvira;
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2002,
Abstract: the histocompatibility of loci abc and locus d of the main histocompatibility system was studied by serological techniques of microlymphocytotoxicity in 383 patients with various hematological diseases. lymphocyte reactivity was compared in the mixed lymphocyte culture of 39 of 145 identical individuals for hla antigens, of whom 29 were negative mlc for 74,35%. there was not 100% correspondence between serological and cellular studies since there was no compatibility in all the cases for hla class ii antigens and in any case for minor histocompatibility antigens that influence both the results of mlc and the causes of failed bone marrow transplantation in identical individuals. this confirms the importance of molecular biology typing studies and of minor histocompatibility antigens
Caracterización fenotípica de las células madre de médula ósea utilizadas en la terapia celular regenerativa
Macías-Abraham,Consuelo; del Valle-Pérez,Lázaro O; Baganet-Cobas,Aymara; Dorticós-Balea,Elvira; Jaime-Fagundo,Juan C; Lam-Díaz,Rosa M; Socarrás-Ferrer,Bertha B; Sánchez-Segura,Miriam; Marsán-Suárez,Vianed; Palma-Salgado,Lourdes; Hernández-Ramírez,Porfirio; Ballester-Santovenia,José M;
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2011,
Abstract: regenerative medicine is a novel therapeutic method with broad potential for the treatment of various illnesses, based on the use of bone marrow (bm) stem cells, whose phenotypic characterization is limited. the paper deals with the expression of different cell membrane markers in mononuclear bm cells from 14 patients who underwent autologous cell therapy, obtained by medullary puncture and mobilization to peripheral blood, with the purpose of characterizing the different types of cells present in that heterogeneous cellular population and identifying the adhesion molecules involved in their adhesion. a greater presence was observed of adherent stem cells from the marrow stroma in mononuclear cells obtained directly from the bm; a larger population of cd90+ cells in mononuclear cells from cd34-/cd45- peripheral blood with a high expression of molecules cd44 and cd62l, which suggests a greater presence of mesenchymal stem cells (msc) in mobilized cells from the marrow stroma. the higher levels of cd34+ cells in peripheral blood stem cells with a low expression of molecules cd117- and dr- suggests the presence of hematopoietic stem cells, hemangioblasts and progenitor endothelial cells mobilized to peripheral circulation. it was found that mononuclear cells from both the bm and peripheral blood show a high presence of stem cells with expression of adhesion molecule cd44 (mmc marker), probably involved in their migration, settling and differentiation.
Aislamiento de células mononucleares de sangre periférica para trasplante de células madre: Método simplificado
Cortina Rosales,Lázaro; Hernández Ramírez,Porfirio; López De Roux,Maríadel Rosario; Artaza Sanz,Heriberto M; Dorticós Balea,Elvira; Macías Abraham,Consuelo; Socarrás Ferrer,Berta B; Lam Díaz,Rosa María; González Suárez,Tania; Matamoros,María de los ángeles; González Iglesias,Ana Iris; Salgado Arocena,Odalis; Hernández Rego,Yakima;
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2008,
Abstract: in the last years, the topic of stem cells has arisen an increasing interest for its therapeutic potential in diseases that have not an effective treatment so far. a prospsective and exploratory study was conducted in patients with obliterant atherosclerosis of the lower limbs to evaluate the safety and effectiveness of a manual method of collection and processing of mononuclear cells and of cd34+ cells, starting from mobilized peripheral blood. the blood was processed in closed collection systems, using hydroxyethyl starch as a potentiator of erythrocyte sedimentation. the patients were treated with granulocyte colony stimulating factor at total doses of 40μcg/kg of weight during 2 days. self-donation was performed when the leukocyte count was higher than 20 x 109/l. to assess the efficacy of the method, the amounts of nucleated cells, of mononuclear cells and of cd 34+ cells in the cellular concentrate were analyzed. cellular viability was determined and a microbiological study of the material obtained was conducted. it was proved that the method is efficient and safe, since adequate cellular levels with a high viability and absence of bacterial contamination are attained. on the other hand, it is simple and cheap, which allows its application in other health centres, particularly in those with less resources. this makes possible that more patients benefit from the stem cell treatment.
Tras la huella de las células madre
Hernández Ramírez,Porfirio; Dorticós Balea,Elvira;
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2010,
Abstract: in past years there was an increasing interest by to know about the biodistribution of stem cells in organism after its perfusion or direct injection in a part of the body. thus, we used different procedures including the cell labeling with distinct fluorochromes, such as the green fluorescence protein and the red fluorescence protein or a plasmid transfection codifying the fluorescent proteins of fluorescent molecular stents to identify the chromosomes. recently non-invasive leading imaging techniques have been introduced including nuclear magnetic resonance. as well as procedures based on radionuclide labeling to obtain the positron emission tomography (pet) images or by photon-emission computed tomography (spect).
Medicina regenerativa: Células madre en enfermedades del corazón
Dorticós Balea,Elvira; Hernández Ramírez,Porfirio;
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2006,
Abstract: la aplicación de la medicina regenerativa en pacientes con enfermedades cardiovasculares, ha sido objeto de numerosas investigaciones en los últimos a?os, tanto en procesos agudos como el infarto del miocardio, crónicos como la cardiopatía isquémica, o ambas situaciones. diferentes fuentes de células se han utilizado. los primeros intentos se iniciaron en el laboratorio con células embrionarias, después se comenzaron a inyectar miocitos autólogos, obtenidos del músculo esquelético y cultivado antes de su inyección. más recientemente surgió como una “nueva estrella” la ya bien conocida célula madre hematopoyética adulta de la médula ósea. se ha hecho evidente que las células de la medula ósea tienen la capacidad de diferenciarse hacia cardiomiocitos. el mecanismo por lo que esto ocurre no está aún bien dilucidado; se plantea que se debe a la plasticidad de estas células, cuando son inyectadas directamente en el área isquémica durante una cirugía de derivación o bien por vía intracoronaria, por vía transendocárdica o por vía sistémica. en la literatura mundial se han comunicado varios estudios al respecto, pero la mayoría abarcan un escaso número de pacientes, pocos tienen grupo control y son estudios no aleatorizados. en ellos se ha demostrado la factibilidad, eficiencia e inocuidad del proceder. sin embargo, aún se mantienen diferentes interrogantes sobre este proceder
Medicina regenerativa: Células madre en enfermedades del corazón Regenerative medicine: Stem cells in heart diseases
Elvira Dorticós Balea,Porfirio Hernández Ramírez
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2006,
Abstract: La aplicación de la medicina regenerativa en pacientes con enfermedades cardiovasculares, ha sido objeto de numerosas investigaciones en los últimos a os, tanto en procesos agudos como el infarto del miocardio, crónicos como la cardiopatía isquémica, o ambas situaciones. Diferentes fuentes de células se han utilizado. Los primeros intentos se iniciaron en el laboratorio con células embrionarias, después se comenzaron a inyectar miocitos autólogos, obtenidos del músculo esquelético y cultivado antes de su inyección. Más recientemente surgió como una “nueva estrella” la ya bien conocida célula madre hematopoyética adulta de la médula ósea. Se ha hecho evidente que las células de la medula ósea tienen la capacidad de diferenciarse hacia cardiomiocitos. El mecanismo por lo que esto ocurre no está aún bien dilucidado; se plantea que se debe a la plasticidad de estas células, cuando son inyectadas directamente en el área isquémica durante una cirugía de derivación o bien por vía intracoronaria, por vía transendocárdica o por vía sistémica. En la literatura mundial se han comunicado varios estudios al respecto, pero la mayoría abarcan un escaso número de pacientes, pocos tienen grupo control y son estudios no aleatorizados. En ellos se ha demostrado la factibilidad, eficiencia e inocuidad del proceder. Sin embargo, aún se mantienen diferentes interrogantes sobre este proceder
Medicina regenerativa: Células madre embrionarias y adultas Regenerative medicine: Embryonic and adult stem cells
Porfirio Hernández Ramírez,Elvira Dorticós Balea
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2004,
Abstract: En los últimos a os ha surgido una nueva rama de la medicina denominada medicina regenerativa, basada fundamentalmente en los nuevos conocimientos sobre las células madre y en su capacidad de convertirse en células de diferentes tejidos. Las células madre se clasifican en embrionarias y somáticas o adultas. Durante varios a os se consideró que la célula madre hematopoyética era la única célula en la médula ósea con capacidad generativa. Sin embargo, estudios recientes han mostrado que la composición de la médula ósea es más compleja, pues en ella se ha identificado un grupo heterogéneo de células madre adultas, entre las que se encuentran las: hematopoyéticas, mesenquimales (estromales), población lateral, células progenitoras adultas multipotentes (MAPC). Varios estudios han sugerido que la potencialidad de algunos tipos de células madre adultas es mayor de lo esperado, pues han mostrado en determinadas condiciones capacidad para diferenciarse en células de diferentes linajes, lo que las acercan a la potencialidad de las células embrionarias. Esto ha creado nuevas perspectivas para el tratamiento de diferentes enfermedades con células madre adultas, lo que inicialmente se pensaba solo podía hacerse con las embrionarias In the last few years, there has emerged a new branch of medicine called regenerative medicine based mainly on the new knowledge about stem cells and their capacity to turn into cells of different tissues. Stem cells are classified into embryonic cells and somatic or adult cells. For many years, it was believed that hematopoietic stem cell was the only one with regenerative capacity in the bone-marrow. However, recent studies have shown that the composition of the bone marrow is more complex an heterogeneous group of adult stem cells such as hematopoietic, mesenchymal (stromal), lateral population and multipotent adult progenitor cells have been identified there. Several studies suggested that the potential of some types of adult stem cells is greater than expected since they have shown their capacity to differentiate into cells of various lineages under certain conditions, which means that their potential is very close to that of the embryonic cells. This has given rise to new prospects for the treatment of a number of diseases with adult stem cells that it was thought to be possible only with the embryonic cells
Tras la huella de las células madre On the track of stem cells
Porfirio Hernández Ramírez,Elvira Dorticós Balea
Revista Cubana de Hematolog?-a, Inmunolog?-a y Hemoterapia , 2010,
Abstract: En los últimos a os ha surgido un gran interés en conocer la biodistribución de las células madre en el organismo después que son infundidas o inyectadas directamente en una parte del cuerpo. Para esto se han usado diferentes procederes, entre ellos, el marcaje de las células con diferentes fluorocromos, tales como la proteína con fluorescencia verde y la proteína con fluorescencia roja; o bien se les hace una transfección con plasmidos que codifican proteínas fluorescentes o se emplean sondas moleculares fluorescentes para la identificación de cromosomas. Recientemente se han introducido técnicas imagenológicas de avanzada no invasivas, entre las que tenemos la resonancia magnético nuclear, así como procederes basados en el marcaje con radionúclidos para la obtención de imágenes detectadas por tomografía por emisión de positrones (PET, del inglés positron emission tomography), o por tomografía computarizada por emisión de fotón único (SPECT, del inglés single- photon emission computed tomography). In past years there was an increasing interest by to know about the biodistribution of stem cells in organism after its perfusion or direct injection in a part of the body. Thus, we used different procedures including the cell labeling with distinct fluorochromes, such as the green fluorescence protein and the red fluorescence protein or a plasmid transfection codifying the fluorescent proteins of fluorescent molecular stents to identify the chromosomes. Recently non-invasive leading imaging techniques have been introduced including nuclear magnetic resonance. As well as procedures based on radionuclide labeling to obtain the positron emission tomography (PET) images or by photon-emission computed tomography (SPECT).
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