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Diagnóstico serológico de la leptospirosis humana mediante 3 variantes de la técnica de hemaglutinación pasiva
Ana Margarita Obregón Fuentes,Magalys Martell
Revista Cubana de Medicina Tropical , 1999,
Abstract: Se realizó un estudio serológico para evaluar 3 variantes de la técnica de hemaglutinación pasiva (HA), con la utilización de eritrocitos de carneros frescos y formalinizados (HC) y glóbulos rojos humanos grupo O Rh negativo formalinizados (HH), no se detectaron diferencias estadísticas significativas de los resultados de la HA y la HC y entre la HC y la HH. Sólo se presentó reacción inespecífica en 2 de los 200 sueros estudiados empleando la HH y la HC. Se observaron anticuerpos heterófilos solamente en el 2,5 % de los sueros estudiados por HH y en el 100 % mediante HC. Se determinaron los parámetros cualitativos para las variantes empleadas y así se evaluó la repetibilidad y reproducibilidad de la variante más útil. A serological study was conducted to evaluate 3 variants of the possive hemagglutination technique (HA) with the use of formalized erythrocytes of fresh lamb (HC) and of formalized Type O, Rh-negative human red blood cells (HH). No significant statistical difference were found between the results of HA and HC and between HC and HH. Unspecific reaction was only observed in 2 of the 200 sera studied by HH and HC. Heterophil antibodies were just observed in 2.5 % of the sera studied by HH, and in 100 % of the sera studied by HC. The qualitative parameters were determined for the variants used, and this way the repetition and reproducibility of the most useful variant was evaluated.
VI Taller Internacional "Leptospirosis Habana 2012". I Curso Pre-Congreso de "Borreliosis de Lyme: del vector a la enfermedad". II Congreso Internacional de Leptospirosis, Sífilis y Borreliosis "Espiroquetas Habana 2012" 6th International Workshop "Leptospirosis Havana 2012". 1st Pre-congress course "Lyme borreliosis: from vector to the disease". 2nd International Congress of Leptospirosis, Syphilis and Borreliosis "Spirochetes Havana 2012"
Carmen Fernández Molina,Ana Margarita Obregón Fuentes
Revista Cubana de Medicina Tropical , 2013,
Abstract:
Tercer Taller y Tercera Reunión Científica Internacional ¨Leptospirosis Habana 2006 Third Workshop and Third International Scientific Meeting ¨Leptospirosis Habana 2006
Carmen Fernández Molina,Ana Margarita Obregón Fuentes
Revista Cubana de Medicina Tropical , 2007,
Abstract:
Lepto tek dip stick y lepto tek dri dot, técnicas útiles en el diagnóstico rápido de la leptospirosis humana
Obregón Fuentes,Ana Margarita; Fernández Molina,Carmen; Rodríguez,José;
Revista Cubana de Higiene y Epidemiolog?-a , 2005,
Abstract: serious cases and risk groups suspected of having human leptospirosis were studied bymeans of rapid diagnosis kits known as lepto tek dri dot and lepto tek dip stick in the national reference laboratory of leptospira of “pedro kourí” tropical medicine institute (ipk). the new kits were experimentally compared with the conventional serological techniques such as indirect hemagglutination (ha) and microagglutination (mat). the study was conducted from january to may, 2002. of 40 suspected patients in critical condition, 20 were positive according to lepto tek dip stick and 10 were positive according to ha results. twenty and nine patients were positive by lepto tek dri dot and mat test respectively. the main serogroups found by mat were seijroe and canicola. the coincidence index between lepto tek dip stick and ha was 72,5% whereas that of lepto tek dri dot and mat was 70%. on the other hand, the coincidence index between the two new techniques was 80 % whereas that of the conventional methods was 85 %. this same parameter measured between lepto tek dip stick and mat was 85 %, and between lepto tek dri dot and ha was 70 %. the introduction of kits lepto tek dri dot and lepto tek dip stick made it possible to detect specific antibodies to leptospira in human leptospirosis-positive cases. of 485 monosera from 424 patients of the risk group, 19 were positive and 44 reactive by ha test. mat revealed 64 positive and 172 reactive monosera. lepto tek dri dot detected 134 positive cases. in this regard, the coincidence index between mat and lepto tek dri dot was 59 % for a total number of 251 coincident cases. the implementation of the state-of-the-art technology known as lepto tek dri dot allowed achieving immediately a rapid result for the final confirmation of each case under study.
Lepto tek lateral flow: un método para el diagnóstico rápido de la leptospirosis humana en Cuba Lepto tek lateral flow: a method for the rapid diagnosis of human leptospirosis in Cuba
Beatriz Martínez Salgueiro,Ana Margarita Obregón Fuentes,Carmen Fernández Molina,José Rodríguez
Revista Cubana de Higiene y Epidemiología , 2005,
Abstract: La técnica de Lepto tek lateral flow (LF) en el diagnóstico serológico y rápido de casos graves con sospecha clínica y epidemiológica de leptospirosis humana se introdujo y se aplicó en el Laboratorio Nacional de Referencia de Leptospiras (LNRL). Se emplearon las técnicas convencionales de laboratorio (microaglutinación [MAT] y hemaglutinación indirecta [HA]) en la confirmación de los casos en estudio. Se estudiaron 40 muestras de sueros correspondientes a 33 pacientes sospechosos de leptospirosis humana, de las cuales se obtuvo positividad en 21 de ellas mediante LF, que representa un 52,5 %. Al aplicar comparativamente las técnicas de LF y HA en 26 monosueros y 7 pares de sueros, se obtuvieron 11 y 5 casos positivos respectivamente. La coincidencia entre ambas fue de un 73 % al estudiar los monosueros y del 71,0 al estudiar los pares de sueros. Al aplicar la MAT en 9 casos sospechosos, resultaron 7 positivos. Los serogrupos más frecuentes encontrados fueron: icterohaemorrhagiae, y canicola. Se detectaron solo 5 casos positivos por las 3 técnicas aplicadas. La coincidencia entre las técnicas de MAT y LF fue del 89 % y la de HA y la MAT del 100,0. La aplicación de la MAT y la HA ofreció confiabilidad en los resultados obtenidos y se evidenció la gran sensibilidad del LF. Se demostró la importancia del uso de sueros pareados para el diagnóstico certero de esta enfermedad. The Lepto Tek Lateral Flow technique (LF) in the serological and rapid diagnosis of severe cases with clinical and epidemiological suspicion of human leptospirosis was introduced in and applied by the National Laboratory of Leptospirosis Reference (NLLR). Conventional lab techniques (microagglutination MAT and indirect hemagglutination HA ) were used in the confirmation of cases under study, 40 serum samples corresponding to 33 patients suspected of human leptospirosis were studied. Of them, 21 samples proved to be positive by LF, accounting for 52.5 %. On comparatively applying the LF and HA techniques to 26 monosera and 7 pairs of serum, 11 and 5 positive cases were obtaind, respectively. The coincidence between them was 73 % on studying monosera and 71.0 on studying the pairs of serum. On applying MAT to 9 suspected cases, 7 of them yielded positive. The most frequently found serogroups were: Icterohaemorrhagiae and Canicola. Only 5 positive cases were detected by the 3 applied techniques. The coincidence between MAT and LF techniques was 89 % and that between HA and MAT was 100.0. The application of MAT and HA offered reliability to the obtained results and it was evidenced the high
Lepto tek dip stick y lepto tek dri dot, técnicas útiles en el diagnóstico rápido de la leptospirosis humana Lepto tek dip stick and lepto tek dri dot, useful techniques in rapid diagnosis of human leptospirosis
Ana Margarita Obregón Fuentes,Carmen Fernández Molina,José Rodríguez
Revista Cubana de Higiene y Epidemiología , 2005,
Abstract: Se estudiaron casos graves y grupos de riesgo, todos sospechosos de leptospirosis humana, mediante el uso de los estuches comerciales de diagnóstico rápido de lepto tek dri dot y lepto tek dip stick, en el Laboratorio Nacional de Referencia de Leptospiras (LNRL) del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" (IPK). Los estuches novedosos se compararon experimentalmente con las técnicas serológicas convencionales hemaglutinación indirecta (HA) y microaglutinación (MAT). El estudio fue realizado en el período de enero a mayo de 2002. De los 40 pacientes graves sospechosos estudiados, 20 fueron positivos por lepto tek dip stick y 10 por HA. Por lepto tek dri dot y MAT, 20 y 9, respectivamente, fueron positivos. Los principales serogrupos encontrados por MAT fueron: Sejroe y Canicola. La coincidencia entre las técnicas de lepto tek dip stick y HA fue del 72,5 y entre el lepto dri dot y la MAT fue del 70 %. El índice de coincidencia entre el lepto tek dip stick y lepto dri dot fue del 80 % y entre MAT y HA fue del 85,0. Este mismo parámetro, medido entre lepto tek dip stick y MAT, fue del 85,0 y entre lepto tek dri dot y HA fue del 70,0. Con la introducción de los estuches lepto tek dri dot y lepto tek dip stick fueron detectados, en los casos positivos de leptospirosis humana, anticuerpos específicos contra leptospira. De los 485 monosueros procedentes de 424 pacientes de grupo de riesgo, 19 fueron positivos y 44 reactivos por HA. Al emplear MAT, 64 y 172, respectivamente, fueron positivos y reactivos. Lepto tek dri dot detectó 134 casos positivos. El índice de coincidencia entre MAT y lepto tek dri dot fue del 59 %, para un total de 251 casos coincidentes. La introducción de la tecnología de avanzada lepto tek dri dot permitió brindar un resultado rápido y de forma inmediata para la confirmación final de cada caso en estudio. Serious cases and risk groups suspected of having human leptospirosis were studied bymeans of rapid diagnosis kits known as lepto tek dri dot and lepto tek dip stick in the National Reference Laboratory of Leptospira of “Pedro Kourí” Tropical Medicine Institute (IPK). The new kits were experimentally compared with the conventional serological techniques such as indirect hemagglutination (HA) and microagglutination (MAT). The study was conducted from January to May, 2002. Of 40 suspected patients in critical condition, 20 were positive according to lepto tek dip stick and 10 were positive according to HA results. Twenty and nine patients were positive by lepto tek dri dot and MAT test respectively. The main serogroups found by MAT wer
Sistemas serológicos rápidos utilizados para la pesquisa de leptospirosis humana en Cuba Rapid serological diagnosis systems for human leptospirosis screening in Cuba
Ana Margarita Obregón Fuentes,Carmen Fernandez Molina,Isabel Martínez Motas,Alina Llop Hernández
Revista Cubana de Medicina Tropical , 2011,
Abstract: Introducción: la leptospirosis humana necesita de un diagnóstico microbiológico rápido y oportuno por ser una enfermedad letal y frecuente en todo el mundo. Objetivo: incrementar la calidad del diagnóstico microbiológico de esta infección, ampliar el conocimiento sobre la circulación de serogrupos de leptospiras en Cuba y demostrar la utilidad de un sistema de aglutinación con partículas de látex cubano y los sistemas inmunocromatogénicos comerciales LEPTO Dipstick, Lepto Tek Lateral Flow, Lepto Tek Dri Dot y SD Leptospira IgM-IgG. Métodos: en esta investigación descriptiva se utilizaron sueros de casos controles positivos y negativos para evaluar y medir el valor diagnóstico de los sistemas serológicos rápidos con respecto al método de referencia de microaglutinación (MAT). Todas las técnicas utilizadas en este reporte aparecen descritas en el Manual de Operaciones y Procederes del Laboratorio de Leptospiras, del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí". Resultados: todos los sistemas estudiados presentaron aceptables valores de sensibilidad, especificidad y concordancia en comparación con el método de referencia internacional de microaglutinación con microrganismos vivos. Se constató la amplia selectividad (reactividad antigénica) y la fiabilidad diagnóstica de los sistemas, se destacan en particular el látex mezclado de producción nacional, el LEPTO Dipstick y el SD Leptospira IgM-IgG. Conclusiones: ninguno de los procedimientos utilizados fue superado en cuanto a su sencillez, rapidez, simplicidad técnica y grado de ejecución al comparárseles con los métodos tradicionales, incluido el de referencia, y todos resultaron útiles en la pesquisa de anticuerpos frente a leptospiras. Introduction: human leptospirosis requires rapid and early microbiological diagnosis since it is a common lethal disease worldwide. Objectives: to increase the quality of microbiological diagnosis of this infection, to expand the knowledge on the circulation of groups of leptospiras in Cuba and to show the benefits of an agglutination assay using Cuban latex particles and of commercial immunochromatogenic systems LEPTO Dipstick, Lepto Tek Lateral Flow, Lepto Tek Dri Dot and SD Leptospira IgM-IgG. Methods: this descriptive research used sera from positive and negative control cases to evaluate and measure the diagnostic value of rapid serological diagnosis systems with respect to the microagglutination method of reference (MAT). All the techniques used in this report are described in the Manual of Operations and Procedures of the Leptospira Lab in "Pedro Kourí" Institute of
Lepto tek lateral flow: un método para el diagnóstico rápido de la leptospirosis humana en Cuba
Martínez Salgueiro,Beatriz; Obregón Fuentes,Ana Margarita; Fernández Molina,Carmen; Rodríguez,José; Rodríguez,Islay;
Revista Cubana de Higiene y Epidemiolog?-a , 2005,
Abstract: the lepto tek lateral flow technique (lf) in the serological and rapid diagnosis of severe cases with clinical and epidemiological suspicion of human leptospirosis was introduced in and applied by the national laboratory of leptospirosis reference (nllr). conventional lab techniques (microagglutination mat and indirect hemagglutination ha ) were used in the confirmation of cases under study, 40 serum samples corresponding to 33 patients suspected of human leptospirosis were studied. of them, 21 samples proved to be positive by lf, accounting for 52.5 %. on comparatively applying the lf and ha techniques to 26 monosera and 7 pairs of serum, 11 and 5 positive cases were obtaind, respectively. the coincidence between them was 73 % on studying monosera and 71.0 on studying the pairs of serum. on applying mat to 9 suspected cases, 7 of them yielded positive. the most frequently found serogroups were: icterohaemorrhagiae and canicola. only 5 positive cases were detected by the 3 applied techniques. the coincidence between mat and lf techniques was 89 % and that between ha and mat was 100.0. the application of mat and ha offered reliability to the obtained results and it was evidenced the high sensitivity of lf. the importance of the use of matched sera for the accurate diagnosis of this disease was demonstrated.
Resultados preliminares de la evaluación del primer sistema látex en el diagnóstico rápido de la leptospirosis humana en Cuba Preliminary results of the evaluation of the first latex system in the rapid diagnosis of human leptospirosis in Cuba
Ana Margarita Obregón Fuentes,Carmen Fernández Molina,María del Carmen Batlle,José Rodríguez
Revista Cubana de Higiene y Epidemiología , 2005,
Abstract: Se elaboró un látex de aglutinación de producción nacional (leptospira - látex - IPK) para el diagnóstico rápido de la leptospirosis humana. La dilución óptima de trabajo del antígeno termorresistente (TR) acoplado a las partículas de látex fue de 1/80. Se emplearon partículas de látex comerciables de 0,8 μm. Se obtuvo una sensibilidad del 86,6 % y una especificidad del 88,7. El índice de coincidencia entre el leptospira - látex - IPK y el lepto dri dot (estuche comercial) fue de un 85 %. Al aplicar el método estadístico de X2, no existieron diferencias significativas entre el leptospira - látex-IPK, MAT (gold standard) y la hemaglutinación pasiva. Se obtuvo, de esta manera, el primer resultado biológico de látex en Cuba, útil en el diagnóstico rápido de la leptospirosis humana, el cual deberá ser evaluado en el terreno para determinar nuevos parámetros, entre ellos, la estabilidad y la reproducibilidad. An agglutination latex of national production (leptospira-latex-IPK) was developed for the rapid diagnosis of human leptospira. The optimum working dilution of the thermoresistant antigen (TR) coupled to the latex particles was 1/80. Commerciable latex particles of 0.8 m were used. A sensitivity of 86.6 % and a specificity of 88.7 % were obtained. The index of coincidence between the leptospira-latex-IPK and the lepto dri dot (commercial set) was 85 %. On applying the statistical method X2, there were no significant differences between leptospira-latex-IPK, MAT (gold standard) and the passive hemagglutination. This way, it was obtained the first biological result of latex in Cuba that is useful for the rapid diagnosis of human leptospirosis, and that should be evaluated in practice to determine new parameters, such as stability and reproducibility.
Detección de anticuerpos IgM contra leptospiras por un sistema comercial ELISA-IgM Detection of IgM antibodies to leptospires by using a commercial ELISA-IgM system
Ana Margarita Obregón Fuentes,Carmen Fernández Molina,Islay Rodríguez González,Yaindrys Rodríguez Olivera
Revista Cubana de Medicina Tropical , 2013,
Abstract: Introducción: la leptospirosis humana es una zoonosis sistémica y transmisible producida por bacterias invasivas del complejo Leptospira interrogans sensu lato. Numerosos métodos se utilizan para el serodiagnóstico de esta entidad clínica, dentro de los cuales se encuentra ELISA. Objetivos: aplicar un nuevo sistema serológico comercial de ELISA, para la pesquisa de anticuerpos IgM contra leptospiras e identificar los serogrupos de leptospiras presentes en los sueros positivos por este sistema. Métodos: de pacientes sospechosos de leptospirosis se estudiaron 27 y 61 sueros con anticuerpos contra leptospiras y sin estos, respectivamente. La técnica de microaglutinación con antígenos vivos (MAT) se utilizó como método de referencia. Los sistemas comerciales de SD Leptospira ELISA-IgM, SD flujo lateral Leptospira IgM y la hemoaglutinación indirecta (HAT) fueron comparativamente empleados. Resultados: 27 sueros con anticuerpos contra leptospiras resultaron positivos por SD Leptospira ELISA-IgM, 20 por SD flujo lateral Leptospira IgM y 9 por hemoaglutinación indirecta. De 61 sueros sin anticuerpos contra leptospiras, 9 y 8 resultaron positivos, respectivamente, por SD Leptospira ELISA-IgM y por SD flujo lateral Leptospira IgM. Los serogrupos Ballum y Canicola predominaron en los sueros positivos por el sistema comercial. La coincidencia entre SD Leptospira ELISA-IgM y la técnica de microaglutinación con antígenos vivos fue de 89,77 %. Conclusiones: SD Leptospira ELISA-IgM muestra una mayor positividad en los sueros estudiados, lo que avalaría su posible introducción en Cuba. Se confirma la amplia reactividad del antígeno usado en SD Leptospira ELISA-IgM, lo cual sugiere mantener una activa vigilancia de laboratorio sobre los serogrupos de leptospiras, a nivel nacional. Introduction: human leptospirosis is a communicable systemic zoonosis caused by the invasive bacteria Leptospira interrogans sensu lato complex. Numerous methods are used for serodiagnosis of this disease, including the ELISA tests. Objectives: to implement a new commercial serological ELISA test (SD Leptospira ELISA-IgM, SD Bioline, Korea) for screening of IgM antibodies and for identification of Leptospira serogroups in positive sera. Methods: twenty seven and sixty one sera, with/without IgM antibodies to leptospires, respectively, were studied. They had been taken from patients suspected of having leptospirosis. The microscopic agglutination test with live antigens (MAT) was the reference method. In addition, other commercial systems such as SD Leptospira IgM Lateral Flow and indirect hemagg
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