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Evaluación bioquímico-inmunológica de infectados crónicos por el virus de la hepatitis B: Comportamiento de la respuesta inmune en sus contactos familiares
Santiesteban Torres,Jorge Arturo; Alerm González,Alina; González Griego,Antonio;
Revista Cubana de Investigaciones Biom??dicas , 2000,
Abstract: chronic infection by hbv is a clear and important cause of morbidity and mortality worldwide. an important problem, for the control and eradication of this disease is the existance of chronic hbv carriers and their family contacts. a biochemical and immunological study of chronic hbv reservoirs were conducted to determine the relation between the concentrations of hbv surface antigen, detected and quantified by the elisa method, and the serum viral dna concentrations; as well as the correlation between the levels of antigenemia and the transaminase values (alat). a direct linking was proved between viral dna and hbsag levels and also between antigen concentration and alat values. a significant percent of carriers with high viral charges and normal enzymatic levels was observed. the performance of immune response to hbv in those persons living with the chronic hbv-infested subjects was analyzed and the frequency of occurence of immune, sensitive and infected persons was estimated resulting in a high number of infected persons and persons living with the chronic patients without protection. qualitative and quantitative elisa were used to assess the response of antibodies to hbsag, induced by vaccines or by normal contacts of blood related and non-related persons in the family, but there was no difference among them. the hbsag concentration of the carrier was associated with levels of antibodies to hbsag; after completion of the vaccination program in blood related and non-related subjects, then the association was found to be negative in the former and the existance of shared gens linked to the control of anti-hbsag response and viral clearing were infered
Redise?o y estandarización de un método inmunoenzimático para detectar anticuerpos anti-estreptoquinasa en muestras de suero humano
López Matilla,Lien; González Griego,Antonio; Santiesteban Torres,Jorge Arturo; Alerm González,Alina;
Revista Cubana de Investigaciones Biom??dicas , 2002,
Abstract: a sandwich, heterogenous, qualitative, doble antigen immunoenzimatic method was standardized to detect anti-streptokinase antibodies in pure samples of human serum. different concentrations of the recovering antigen and conjugate dilutions, as well as various times and temperatures of incubation of the samples were assayed. the cut-off value of the assay and its detection limit were established and it was proved if there were some unspecificities. 0.1 mg/ml was determined as an optimal recovering concentration for a conjugate dilution of 1:100 000. the optimum conditions of incubation of the samples were 30 min at lab temperature and there were no interferences of other analytes with the technique.the optical densities between 0.282 and 0.654 were established as normal values of the technique.
Estudio del transporte madre-hijo de anticuerpos antiestreptoquinasa
Lien López Matilla,Antonio González Griego,Alina Alerm González,Arturo Santiesteban Torres
Revista Cubana de Investigaciones Biom??dicas , 2002,
Abstract: Se estudió cómo se comporta el transporte de anticuerpos anti-estreptoquinasa entre la madre y el recién nacido y cuáles son los factores que influyen en este. Se colectaron 125 muestras sanguíneas de puérperas, por la vena antecubital y de sus respectivos hijos a partir del cordón umbilical. Se confeccionaron encuestas para la recolección de datos a partir de las historias clínicas de las madres y los recién nacidos. Se empleó un método inmunoenzimático, heterogéneo, cualitativo, tipo sandwich de doble antígeno para la detección de anticuerpos anti-estreptoquinasa. A partir de los resultados obtenidos se concluyó que existe un transporte activo de los anticuerpos anti-estreptoquinasa de la madre al feto y que este transporte se ve influenciado por la edad cronológica de la madre, la edad gestacional, el estado nutricional de la madre y el peso del recién nacido. The behavior of the transport of streptokinase antibodies from the mother to the newborn infant, as well as the factors influencing on it, were studied here. 125 blood samples were obtained from the antecubital vein of the puerperas and from the umbilical cord of their children. Surveys were done to collect data from the medical histories of the mothers and the newborn infants. An immunoenzimatic, heterogenous and qualitatitve sandwich doble antigen method was used to detect anti-streptokinase antibodies. According to the results, it was concluded that there is an active transport of anti-streptokinase antibodies from the mother to the fetus and that this transport is influenced by the chronological age of the mother, the gestational age, the mother’s nutritional status and the birth weight.
Redise o y estandarización de un método inmunoenzimático para detectar anticuerpos anti-estreptoquinasa en muestras de suero humano
Lien López Matilla,Antonio González Griego,Jorge Arturo Santiesteban Torres,Alina Alerm González
Revista Cubana de Investigaciones Biom??dicas , 2002,
Abstract: Se procedió a estandarizar un método inmunoenzimático, heterogéneo, cualitativo, tipo sandwich de doble antígeno para la detección de anticuerpos contra la estreptoquinasa en muestras puras de suero humano. Se ensayaron diferentes concentraciones del antígeno de recubrimiento y diluciones del conjugado, así como diferentes tiempos y temperaturas de incubación de las muestras. Se estableció el valor de corte del ensayo y su límite de detección y se comprobó si existían inespecificidades. Se determinó como concentración óptima de recubrimiento 0,1 μg/mL para una dilución del conjugado de 1:100 000. Las condiciones óptimas de incubación de las muestras fueron 30 min a temperatura de laboratorio y no se comprobaron interferencias de otros analitos con la técnica. Se establecieron como valores normales de la técnica las densidades ópticas que se encuentran entre 0,282 y 0,654. A sandwich, heterogenous, qualitative, doble antigen immunoenzimatic method was standardized to detect anti-streptokinase antibodies in pure samples of human serum. Different concentrations of the recovering antigen and conjugate dilutions, as well as various times and temperatures of incubation of the samples were assayed. The cut-off value of the assay and its detection limit were established and it was proved if there were some unspecificities. 0.1 mg/mL was determined as an optimal recovering concentration for a conjugate dilution of 1:100 000. The optimum conditions of incubation of the samples were 30 min at lab temperature and there were no interferences of other analytes with the technique.The optical densities between 0.282 and 0.654 were established as normal values of the technique.
Evaluación y control de un brote epidémico de hepatitis viral en escolares guineanos: Eficacia de heberbiovac HB
Antonio González Griego,Alina Alerm González,Graciela Delgado,Irma Vega García
Revista Cubana de Investigaciones Biom??dicas , 2000,
Abstract: Se estudiaron 448 muestras serológicas con el propósito de conocer la etiología de un brote de hepatitis aguda entre jóvenes guineanos que estudiaban en Cuba. Se determinaron los anticuerpos de clase IgM contra el virus de la hepatitis A (anti-VHA IgM), los anticuerpos contra la proteína central del virus de la hepatitis C (anti-VHC), el antígeno de superficie del virus de la hepatitis B (AgsHB) y su anticuerpo (anti-AgsHB) y los anticuerpos dirigidos contra el virus de la hepatitis Delta (anti-VHD). Se encontró positividad para el AgsHB en 124 sueros (27,67 %). A 86 sueros AgsHB positivos se les determinó la presencia del antígeno asociado con la replicación viral en la infección por virus B (AgsHB) y la detección de los anticuerpos totales (IgG e IgM) contra la proteína central del virus de la hepatitis B (anti-AgcHB total) se hizo en 50 de esas muestras. Los estudiantes que no tuvieron marcadores de infección por el virus B se vacunaron con la vacuna cubana antihepatitis B, con el empleo de 3 dosis de 20 mg mediante un esquema de 30 d interdosis. No se encontraron positivos el anti-VHA IgM ni el anti-VHC. La cuantificación del AgsHB permitió clasificar como agudos con buen pronóstico a 3 de los 14 jóvenes que presentaron síntomas de hepatitis y como crónicos a los 121 restantes. De los sueros de 3 fallecidos con un cuadro de hepatitis fulminante, 2 fueron AgsHB positivos y 1 anti-AgsHB positivo, y el tiempo de vida media estimado para el antígeno fue de 48 h, a diferencia del obtenido para los agudos con buena evolución, que resultó de 7 d aproximadamente; mientras que en los crónicos fue como promedio de 60 d. En los reservorios crónicos se detectó una elevada antigenemia (59 % con cifras de AgsHB entre 10 y 100 mg/mL) en asociación con la presencia del AgeHB, que fue positivo en 31 % de los sueros B. Se encontraron anticuerpos anti-VHD en 15 % de los sueros AgsHB positivos analizados, con 66 % en los fallecidos. La cuantificación del AgsHB permitió establecer criterios de clasificación pronóstica en los infectados. La asociación de la presencia del AgeHB en los reservorios crónicos con altas cifras de AgsHB puso de manifiesto el valor de la cuantificación del antígeno de superficie como indicador indirecto de infecciosidad. La circulación del virus Delta se consideró un factor contribuyente para la aparición del brote y la mortalidad. Después de la vacunación masiva de los susceptibles no aparecieron nuevos casos clínicos, se obtuvo seroprotección en 98 % de los inmunizados, con medias geométricas de 1 398 UI/L Four hundred and forty eight serologic
Evaluación bioquímico-inmunológica de infectados crónicos por el virus de la hepatitis B: Comportamiento de la respuesta inmune en sus contactos familiares
Jorge Arturo Santiesteban Torres,Alina Alerm González,Antonio González Griego
Revista Cubana de Investigaciones Biom??dicas , 2000,
Abstract: La infección crónica por el virus de la hepatitis B (VHB) es una clara e importante causa de morbilidad y mortalidad en el mundo. Un importante problema para el control y la erradicación de la enfermedad es la exisniveles de anti-AgsHB, después del esquema completo de vacunación en consanguíneos y no consanguíneos, resultó ser de tipo negativa en los primeros e infirió la existencia de genes compartidos relacionados con el control de la respuesta anti-AgsHB y con el aclaramiento viral Chronic infection by HBV is a clear and important cause of morbidity and mortality worldwide. An important problem, for the control and eradication of this disease is the existance of chronic HBV carriers and their family contacts. A biochemical and immunological study of chronic HBV reservoirs were conducted to determine the relation between the concentrations of HBV surface antigen, detected and quantified by the ELISA method, and the serum viral DNA concentrations; as well as the correlation between the levels of antigenemia and the transaminase values (ALAT). A direct linking was proved between viral DNA and HbsAg levels and also between antigen concentration and ALAT values. A significant percent of carriers with high viral charges and normal enzymatic levels was observed. The performance of immune response to HBV in those persons living with the chronic HBV-infested subjects was analyzed and the frequency of occurence of immune, sensitive and infected persons was estimated resulting in a high number of infected persons and persons living with the chronic patients without protection. Qualitative and quantitative ELISA were used to assess the response of antibodies to HbsAg, induced by vaccines or by normal contacts of blood related and non-related persons in the family, but there was no difference among them. The HbsAg concentration of the carrier was associated with levels of antibodies to HbsAg; after completion of the vaccination program in blood related and non-related subjects, then the association was found to be negative in the former and the existance of shared gens linked to the control of anti-HbsAg response and viral clearing were infered
Inmunogenicidad de la vacuna cubana recombinante heberbiovac HB en modelos experimentales y aplicados al humano
González Ramírez,Victoria Esther; González Griego,Antonio; Ramírez Albajés,Victoria; Alerm González,Alina;
Revista Cubana de Investigaciones Biom??dicas , 2000,
Abstract: one of the fundamental pillars in the control, elimination and possible eradication of b-d viral hepatitis is the use of the cuban-made hepatitis b vaccine. experimental models as well as models for humans were developed to study immunogenicity using various routes of administration, doses and schedules. balb/c mice were used on experimental basis to which 1 mg/dose were administered by intramuscular(im) and intraperitoneal (ip) within three different vaccination schedules, i,e, at 0, 1, and 2 weeks; 0, 1 and 4 weeks, and 0, 4 and 8 weeks. immunogenicity was stufied through quantification of antibodies to surface antigens by using an immunoenzymatic method. seroconversion was present in all animals at 0, 1 and 4 and 0, 1, and 8 weeks schedule. however, in 0, 1 and 2 schedule, ip route of administration was more immunogenic than im, with 60% and 35% seroconversion respectively. ip route had a lower variation coefficient than 0, 1 and 4 week and 0, 4 and 8 schedules were compared, but anyway, it was high even for balb/c animals. medical and nursing students were immunized with 20 mg/dose im and 2mg/dose intradermally within 0, 1 and 4 week and 0,4 and 8 w schedules. it was showed that seroprotection and hyperesponse were greater in 0, 4 and 8 week vaccination schemes regardless of the route of administration and that 0, 1 and 4 w schedule does not bring required immunogenicity, therefore, it should be used exceptionally. national antibody standards were obtained to be applied in anti-hbsag quantification methods both in experimental and human-based studies
Inmunogenicidad de la vacuna cubana recombinante heberbiovac HB en modelos experimentales y aplicados al humano
Victoria Esther González Ramírez,Antonio González Griego,Victoria Ramírez Albajés,Alina Alerm González
Revista Cubana de Investigaciones Biom??dicas , 2000,
Abstract: Uno de los pilares fundamentales en el control, la eliminación y posible erradicación de la hepatitis viral tipo B-D es la utilización de la vacuna de producción cubana contra la hepatitis B. Se desarrollaron modelos experimentales y aplicados al humano que permitieron el estudio de inmunogenicidad mediante distintas vías, dosis y esquemas. Se trabajó experimentalmente se trabajó con ratones BALB/c, con la aplicación de 1 mg/dosis por vía intramuscular (IM) e intraperitoneal (IP) en 3 esquemas diferentes 0-1-2, 0-1-4 y 0-4-8 semanas. La inmunogenicidad se estudió mediante la cuantificación del anticuerpo contra el antígeno de superficie (AgsHB), con la aplicación de un método inmunoenzimático. En todos los animales hubo seroconversión con los esquemas 0-1-4 y 0-4-8 semanas. En el esquema 0-1-2 la vía IP resultó más inmunogénica que la vía IM, produjeron 60 y 35 % de seroconversión, respectivamente. La vía IP tuvo un coeficiente de variación menor cuando se compararon los esquemas 0-1-4 y 0-4-8 semanas, de todas formas resultó alto para ser animales BALB/c. En humanos se inmunizaron estudiantes de medicina y enfermería con el empleo de 20 mg/dosis por vía IM y 2 mg/dosis vía intradérmica (ID), con los esquemas 0-1-4 y 0-4-8 semanas; se demostró que la seroprotección e hiperrespuesta era mayor en el esquema 0-4-8 independientemente de la vía utilizada y que el esquema 0-1-4 no produjo la inmunogenicidad requerida por lo que debe ser utilizado de manera excepcional. Se obtuvieron estándares de anticuerpos nacionales para la aplicación en métodos de cuantificación de anti-AgsHB, tanto en estudios experimentales como en humanos One of the fundamental pillars in the control, elimination and possible eradication of B-D viral hepatitis is the use of the Cuban-made hepatitis B vaccine. Experimental models as well as models for humans were developed to study immunogenicity using various routes of administration, doses and schedules. Balb/c mice were used on experimental basis to which 1 mg/dose were administered by intramuscular(IM) and intraperitoneal (IP) within three different vaccination schedules, i,e, at 0, 1, and 2 weeks; 0, 1 and 4 weeks, and 0, 4 and 8 weeks. Immunogenicity was stufied through quantification of antibodies to surface antigens by using an immunoenzymatic method. Seroconversion was present in all animals at 0, 1 and 4 and 0, 1, and 8 weeks schedule. However, in 0, 1 and 2 schedule, IP route of administration was more immunogenic than IM, with 60% and 35% seroconversion respectively. IP route had a lower variation coefficient than 0, 1 and 4
Seguridad e inmunogenicidad de la vacuna cubana heberbiovac hb en poblaciones de América, Europa, áfrica y Asia
Ramírez Albajés,Victoria; González Griego,Antonio; Alerm González,Alina; Vega García,Irma; Pentón Arias,Eduardo; González Griego,Martha;
Revista Cubana de Investigaciones Biom??dicas , 2000,
Abstract: reactogenecity and immunogenicity of the cuban anti-hbv vaccine called herberbiovac hb were evaluated in 2 942 adults and 804 children from a number of countries in 3 continents by using 3 doses of this vaccine with different innoculation schedules and routes of administration. only pain and local induration were found in 15 to 25% of the vaccinated people. seroprotection was as follows: 98% in children and 82% in adults , with only two doses of vaccination 60 days after the starting of the schedule; 92% and 100% respectively 75 days after the completion of the vaccination program; over 96% in adults after one year when the im administration was used. after 2 years of finishing the vaccination, seroprotection reached 100% in children and adults alike with a hyperesponse of 79% and 71% respectively. the vaccine heberbiovac hb shows high immunogenicity with very short latency, intensity higher than other plasmatic and recombinant vaccines and great durability. this vaccine had an booster effect on those individuals showing hyperesponse to other anti-hb vaccines because 15 days after the innoculation, 75% of vaccinated persons had protective antibodies in their sera
Respuesta pos-vacunal y persistencia de anticuerpos contra el virus de la hepatitis B en ni os asmáticos y no asmáticos vacunados con eberbiovac-HB
Alina Alerm González,Antonio González Griego,Victoria Ramírez Albajés,Mahé Martínez Pérez
Revista Cubana de Investigaciones Biom??dicas , 2000,
Abstract: Se estudió la presencia de los anticuerpos anti-AgsHB en 1 280 ni os con edades entre 7 meses y 3 a os, que recibieron la vacuna cubana antihepatitis B, Heberbiovac-HB al nacimiento, al mes y 6 meses de edad dentro del Programa Nacional de Inmunización en Cuba. Se determinó la presencia del AgsHB y se cuantificaron los anticuerpos en el suero mediante métodos ELISA sandwich, desarrollados y validados en el Laboratorio de Inmunología. Teniendo en cuenta el tiempo transcurrido desde el final de la vacunación, la muestra se dividió en 3 grupos: entre 7 meses y 1 a o, entre 1 y 2 a os, y entre 2 y 3 a os. Ninguno de los ni os presentó marcadores de infección y los porcentajes de seroprotección fueron 96,6 en el grupo de 7 meses a 1 a o, y de 100 en los grupos de 1 a 2 y de 2 a 3 a os. Los porcentajes de ni os con cifras de anti-AgsHB superiores o iguales a 100 UI/L fueron de 93,1, 90,7 y 77,8, respectivamente. Las medias geométricas de anti-AgsHB fueron de 1 056, 699 y 483 UI/L para cada grupo. Se encontraron diferencias significativas en los porcentajes de seroprotección, hiperrespuesta y medias geométricas de anti-AgsHB cuando se compararon estas variables entre ni os con historia de asma bronquial (687,8, 620,2, y 402,9 UI/L) y otros sin este antecedente en los 3 grupos (1 341, 1 047,8, y 528,3 UI/L); las concentraciones fueron mucho más elevadas en los no asmáticos. Estos resultados podrían indicar que aún con antígenos no alergénicos se puede inducir una respuesta a predominio Th 2 en asmáticos y que por causa de la citofilia de las inmunoglobulinas de clase E los anticuerpos no son detectados, o bien que la respuesta es de hecho menor como consecuencia del carácter de disreactor de los asmáticos. Se concluye que la inmunogenicidad de la vacuna en una población abierta es comparable a la de los estudios controlados, y que no se necesita dosis de refuerzo al menos después de transcurridos 4 a os de finalizado el esquema, si se tiene en cuenta la cinética de desaparición del anti-AgsHB. Se requiere un estudio controlado en poblaciones de asmáticos, que permita verificar los resultados obtenidos y darles explicación The presence of anti-AgsHB antibodies was studied in 1 280 children aged from 7 months to 3 years, who were administered the Cuban anti-hepatitis B vaccine Heberbiovac HB when they were born, at 1 and 6 months of age as part of the National Immunization Program in Cuba. AgsHB was detected and serum antibodies were determined by ELISA sandwich methods, developed and validated in the Immunology Laboratory. Considering the time elapsed from the en
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